SDHA在成年大鼠心肌细胞高糖状态下缺氧后处理中保护作用的研究

发布时间：2020-12-14 05:56

　　目的:1.观察琥珀酸脱氢酶黄素蛋白在缺氧后处理减轻正常成年大鼠心肌细胞缺氧复氧损伤中的作用;2.观察高糖浓度环境对正常成年大鼠心肌细胞缺氧后处理的影响;3.观察缺氧后处理在成年大鼠心肌细胞高糖状态下减轻缺氧复氧作用下降与琥珀酸脱氢酶黄素蛋白的关系。方法:通过体外心脏灌注装置（MPA）分离成年大鼠心肌细胞,并用正常葡萄糖浓度和高浓度葡萄糖培养基培养心肌细胞48h。随机分为正常组（N组）、缺氧复氧组（HR组）、缺氧后处理组（HPO组）、si RNA沉默SDHA处理+缺氧复氧组（HR+si RNA SDHA组）、si RNA沉默SDHA处理+缺氧后处理组（HPO+si RNA SDHA组）和相应的空白腺病毒感染到对照组中。按下述实验条件进行处理:N组:37℃培养箱中持续培养105分钟;HR组:缺氧45分钟后,复氧60分钟;HPO组:在HR基础上,缺氧45分钟后,氧合5分钟,然后缺氧5分钟,共3个循环后,再氧合30分钟;HR+si RNA SDHA组:腺病毒成功感染沉默SDHA蛋白表达后给予相应的HR处理;HPO+si RNA SDHA组:腺病毒成功感染沉默SDHA蛋白表达后给予相应的HPO处... 

【文章来源】：遵义医科大学贵州省

【文章页数】：69 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

蛋白定量标准曲线图

图 1 蛋白定量标准曲线图2.8.3 制备 SDS-PAGE 凝胶（1）根据蛋白分子量大小 SDHA(72KD)配制 10%分离胶，β-actin (42KD)配制 12%分离胶各 5ml（表 3），加胶到玻璃之间至离最高点约 1.5cm。（2）加水覆盖至最高平面待胶凝固。（3）配制 5%浓缩胶 2ml（表 3）。孔号 0 1 2 3 4 5 6 7蛋白标准溶液（μL） 0 1 2 3 4 5 6 7去离子水（μL） 20 19 18 17 16 15 14 13对应蛋白含量（μg） 0 5 10 15 20 25 30 35试剂 5%浓缩胶 10%分离胶 12%分离胶

图 3 正常成年大鼠各组心肌细胞活力的变化注：与 N 组比较，*P<0.05；与 HR 组比较，#P<0.05.成年大鼠各组心肌细胞线粒体膜电位的变化心肌细胞线粒体膜电位较 N 组、HPO 组低，HPO 组心肌细胞低（P＜0.05），如表 5、图 4-5。N 组 HR 组 HPO 组图 4 正常成年大鼠各组心肌细胞线粒体膜电位的变化

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：2915942