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SIRT1通过NF-κB信号通路对HCAEC炎症反应的影响及机制的研究

发布时间:2020-12-16 11:45
  目的:本研究采用ox-LDL诱导HCAEC损伤,建立动脉粥样硬化细胞模型,探讨SIRT1对动脉粥样硬化中炎症的影响及可能机制。方法:1.Sirt1基因表达的验证。取对数生长期HCAEC,分为正常对照组、空质粒对照组、空质粒+ox-LDL组、Sirt1过表达+ox-LDL组、Sirt1干扰+ox-LDL组,PDTC(NF-κB阻滞)+Sirt1干扰+ox-LDL组。利用Lipofectamine 2000脂质体转染法转染人冠状动脉内皮细胞株24h后加入ox-LDL继续培养24h,荧光显微镜下观察转染情况;应用RT-PCR检测细胞中Sirt1的mRNA水平;Western blot方法检测细胞中SIRT1的蛋白表达水平。2.研究SIRT1对HCEAC炎症反应的影响。取对数生长期HCAEC,分为正常对照组、空质粒对照组、空质粒+ox-LDL组、Sirt1过表达+ox-LDL组、Sirt1干扰+ox-LDL组。应用RT-PCR检测ICAM-1的mRNA水平;Western blot方法检测细胞中ICAM-1蛋白表达水平;ELISA法检测各组IL-1、hs-CRP的表达。3.探讨SIRT1发挥抗... 

【文章来源】:内蒙古医科大学内蒙古自治区

【文章页数】:58 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

SIRT1通过NF-κB信号通路对HCAEC炎症反应的影响及机制的研究


-1MTT检测24h不同浓度ox-LDL对HCAEC存活率的影响

蛋白表达,显著性差异,对照组,浓度


图 3-1-2-1 各组 ICAM-1 mRNA 相对表达量注: ***p<0.001,****p<0.0001。n blot 检测 ICAM-1 的蛋白表达常对照组、PBS 组、25μg/ml ox-LDL 组、50μg/ml 序上样检测,结果如图 3-1-2-2-1。析结果显示:25μg/ml ox-LDL 组(0.401±0.012)ICA04±0.005)比较,未见显著性差异;随着 ox-LDL 浓度.527±0.006)、100μg/ml ox-LDL 组(0.724±0.008)I比显著升高(p<0.05),100μg/ml ox-LDL 组升高)与正常对照组未见明显差异,见图 3-1-2-2-2。

炎症因子,学位论文,医科大学,硕士研究生


内蒙古医科大学硕士研究生学位论文(2019) 表 3-1-2-3 细胞上清液中炎症因子的比较(pg/ml)Table 3-1-2-3 Comparison of inflammatory factors in cell supernatant (pg/ml)组别 n IL-1 hs-CRP正常对照组 3 1.621±0.061 1.663±0.045PBS 组 3 1.602±0.039 1.656±0.05725μg / ml ox-LDL 组 3 1.646±0.046 1.848±0.12650μg / ml ox-LDL 组 3 1.731±0.034 4.511±0.139****100μg / ml ox-LDL 组 3 2.889±0.113**** 7.366±0.240****注:****p<0.0001

【参考文献】:
期刊论文
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[7]氧化低密度脂蛋白可影响内皮祖细胞的功能:如何提高其数量和功能?[J]. 王凤娇,高翔,尹航,陈丽,秦树存,杨娜娜.  中国组织工程研究. 2018(29)
[8]Sirt家族与肠道疾病[J]. 林思睿,张群,吴巧凤.  世界华人消化杂志. 2018(20)
[9]SIRT家族成员对肿瘤恶性演进的调控作用[J]. 钱美佳,胡燕,朱虹,何俏军,杨波.  药学学报. 2018(08)
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硕士论文
[1]高糖环境下Sirt1通过P38-MAPK影响小鼠足细胞中TTP及炎症因子的表达[D]. 于海霞.郑州大学 2017
[2]芍药苷对ox-LDL致内皮细胞损伤的干预作用[D]. 翟小菊.河南大学 2012



本文编号:2920084

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