MiR-223-5p/-3p协同抑制缺血再灌注心肌细胞的程序性坏死

发布时间：2020-12-16 20:49

　　目的:心肌缺血再灌注诱导的细胞死亡受多个基因的调控。最近文献报道已经观察到:在败血症的小鼠心肌miR-223-5p和miR-223-3p的表达发生变化而且发挥其生物学效应;同时发现,miR-223-3p在缺血再灌注心肌中表达水平明显上调。近年来实验证明细胞程序性坏死是心肌细胞死亡的重要方式,而且受基因的调控;同时文献已经报道:缺血再灌注上调心肌RIP1（Receptor-interacting protein 1,受体相互作用蛋白1）、RIP3（Receptor-interacting protein 3,受体相互作用蛋白3）等坏死通路相关蛋白表达。本实验主要观察miR-223-5p/-3p是否协同调控缺血再灌注心肌诱导的心肌细胞程序性坏死。方法:本实验中,我们应用Real-time PCR观察在体和离体缺血再灌注小鼠心肌miR-223-5p和-3p的动态表达变化。应用pre-miR-223转基因小鼠和敲除基因小鼠的在体LAD（Left anterior descending branch,左前降支）阻断心肌缺血再灌注模型和离体全心缺血再灌注模型,从器官水平观察:两组小鼠心肌梗死面积和... 

【文章来源】：山西医科大学山西省

【文章页数】：115 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
Abstract
常用缩写词中英文对照表
前言
第一部分 小鼠心肌缺血再灌注24小时内miR223-5p/-3p-表达变化
    1 材料与方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2 结果
        2.1 小鼠缺血再灌注模型建模情况
        2.2 在体和离体小鼠心肌在缺血再灌注不同时期miR223-5p/-3p-的表达水平
    3 讨论
    4 结论
第二部分 miR223-转基因小鼠和敲除基因小鼠的建立及对小鼠心肌缺血再灌注损伤的影响和机制研究
    第一节 miR223-转基因小鼠和敲除基因小鼠的建立及对小鼠心肌缺血再灌注损伤的影响
        1 材料和方法
            1.1 材料
            1.2 方法
        2 结果
            2.1 转基因小鼠组实验结果
            2.2 敲除基因（knockout）小鼠组实验结果
        3 结论
    第二节 miR223-调控缺血再灌注心肌的RIP1/3-MLKL信号级联通路和炎症反应
        1 材料与方法
            1.1 材料
            1.2 方法
        2 结果
            2.1 miR223-过表达对缺血再灌注心肌细胞RIP1/3-MLKL通路的影响
            2.2 敲除miR223-对缺血再灌注心肌细胞RIP1/3-MLKL通路的影响
            2.3 过表达/敲除miR223-5p/-3p-对缺血再灌注心肌interleukin（IL）-1β和tumornecrosisfactor-α（TNF-α）mRNA的影响
            2.4 NEC-1s阻断RIP1激酶对pre-miR223KO-小鼠遭受在体和离体心肌缺血再灌注心功能恢复的影响
        3 讨论
        4 结论
第三部分 MiR223-5p-和-3p介导小鼠缺血再灌注心肌细胞RIP1/3-MLKL通路和NLRP3inflammasome机制的探讨
    1 材料和方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2 结果
        2.1 miR223-5p-直接作用于靶蛋白DR6和TNFR1的3’UTR区域发挥作用
        2.2 双荧光素酶报告基因分析
        2.3 Westernblotting进一步验证过表达和敲除miR223-5p-对其靶蛋白DR6和TNFR1的表达的影响
        2.4 Westernblotting从蛋白水平验证过表达和敲除miR223-3p-对其靶蛋白IKKα和NLRP3的表达的影响
    3 讨论
全文主要结论
参考文献
综述
    参考文献
在学习期间承担/参与的科研课题与研究成果
个人简历


【参考文献】：
期刊论文
[1]微小RNA在心血管疾病中的研究进展[J]. 杜银苹,李东野.  中华临床医师杂志(电子版). 2014(07)



本文编号：2920759