PI3K/Akt/FoxO3a信号通路在FGF-2拮抗心肌细胞凋亡中的作用研究

发布时间：2021-01-17 09:24

　　目的探讨FGF-2拮抗氧化应激引起的H9c2心肌细胞凋亡的新机制。方法1.采用体外培养的H9c2心肌细胞，用不同浓度（0，50，100，200，400μmol/L）的H2O2处理6h，用MTT法筛选出H2O2引起细胞凋亡的最适浓度；用不同浓度（0，2.5，5，10，20ng/ml）的FGF-2与培养的H9c2心肌细胞共同孵育0.5h，再用H2O2刺激6h后，用MTT法筛选FGF-2拮抗H2O2引起的细胞凋亡的最适浓度；2.100μmol/L H2O2处理H9c2心肌细胞不同时间后，Western blot检测细胞内Akt, p-Akt, FoxO3a, p-FoxO3a和Bim蛋白的表达变化。3.进一步实验分组：（l）对照组：以不含FGF-2的DMEM培养液培养H9c2心肌细胞45min；（2） H2O2组：培养液中加入终浓度为100μmol/L H2O2刺激45min；（3） FGF-2+H2O2组：以含10ng/ml FGF-2的DMEM培养液培养细胞30min后，100μmol/LH2O2刺激45min；（4） FGF-2+H2O2+LY294002（PI3K/Akt信号通路抑制... 

【文章来源】：南华大学湖南省

【文章页数】：60 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

FGF-2减轻H2O2对H9c2心肌细胞活力的抑制作用Fig1.ProtectiveeffectsofFGF-2onHO-inducedH9c2cardiomyocytesinjury.(A)H9c2

LY294002 逆转 FGF-2 对 H2O2损伤心肌细胞活性的抑t with LY294002 antagonized the protective effecinjury(MTT assay). *P < 0.05, compared with cont2group;﹠P < 0.05, compared with H2O2+FGF-2 group.（O2诱导的 H9c2 心肌细胞凋亡的影响-2 是否能拮抗 H2O2诱导的 H9c2 心肌细胞凋亡100μmol/L）组；FGF-2+H2O2（10ng/ml FGF-2H2O2+LY294002 （ 10ng/mlFGF-2+100μmo分别处理 6h 后收集细胞。首先采用 Hoechst核形态变化(图 3A)。Hoechst 染色后，正常细胞椭圆形，清晰完整，体积较大，荧光染色呈匀染，固缩，荧光染色呈高亮，或呈碎块状致密浓，H2O2处理组与对照组相比，凋亡细胞数量明

FGF-2+H2O2组相比，呈绿色荧光的凋亡细胞明显增多。进一步采用PI流式细胞术定量分析各组细胞的凋亡情况。如图3C所示，H2O组细胞凋亡率为 27.24%，FGF-2 预孵育后，细胞凋亡率可降至 6.21%(P<0.01)；FGF-2+H2O2+LY294002 组 与 FGF-2+H2O2组 相 比 ， 细 胞 的 凋 亡 率 升 高 至17.89%(P<0.05)。此结果与 Hoechst 染色和 TUNEL 染色的结果基本一致。这些数据表明，FGF-2 可以拮抗 H2O2所诱导的心肌细胞凋亡，并且其拮抗作用与PI3K/Akt 信号通路有关。

【参考文献】：
期刊论文
[1]Improved myocardial perfusion and cardiac function by controlled-release basic fibroblast growth factor using fibrin glue in a canine infarct model[J]. Shao-ping NIE1,Xiao WANG1,Shi-bin QIAO1,Qiu-tang ZENG2,Ju-quan JIANG2,Xiao-qing LIU2,Xiang-ming ZHU2,Guo-xiang CAO2,Chang-sheng MA1 (1Department of Cardiology,Beijing Anzhen Hospital,Capital Medical University,Beijing 100029,China) (2Union Hospital of Tongji Medical College,Huazhong University of Science and Technology,Wuhan 430030,China).  Journal of Zhejiang University-Science B（Biomedicine & Biotechnology）. 2010(12)



本文编号：2982604