血管外周脂肪组织let-7b调节ADRB3参与血管炎症的机制研究

发布时间：2021-02-10 04:04

　　研究背景与目的:高血压导致的血管损伤是一种慢性低度的炎症反应过程,特别是越来越多的研究表明血管外膜细胞炎症反应不仅参与高血压,而且还参与动脉粥样硬化及血管再狭窄等多种血管病变过程。血管外周脂肪组织作为一重要的外膜组成成分,通过分泌多种生物活性物质参与血管生理病理功能的调控。我们之前的研究发现血管外周组织分泌炎症因子参与醋酸去氧皮质酮（DOCA）-盐高血压模型的血管重塑调节。而炎症因子的表达受到多种因素的调节,包括转录水平的调节和转录后水平的调节,其中miRNA是新近来发现的转录后调控因子。外周脂肪组织中miRNA是否参与调控血管炎症仍不清楚。本研究拟在DOCA-盐高血压小鼠模型中发掘血管外周脂肪中与血管炎症相关的miRNA,并研究其功能。研究方法:1.建立DOCA-盐高血压模型:C57雄性小鼠左侧单侧肾切除后,在肩胛骨处皮下埋入DOCA泵并给予高盐饮水,模型建好后通过尾动脉测量血压。苏木素伊红（H&E）染色和免疫荧光染色测定血管外周脂肪组织结构和炎症相关因子的表达。2.芯片筛选各组组织中差异表达miRNA,并通过LNA-RT-PCR方法验证感兴趣的miRNA。3.预测靶基因并通... 

【文章来源】：上海交通大学上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：113 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

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m3.2.2 let-7b 对 293T 细胞中 pGL3-ADRB3-3’UTR 荧光素酶表达的影响共转染的各组293T细胞的荧光素酶表达情况见图16。共转染pGL3-ADRB3-3’UTR，pRL-TK 和 control mimics 时，不同浓度梯度的 control mimics 对荧光素酶活性没有影响（图 16 A）。共转染 pGL3-ADRB3-3’UTR，pRL-TK 和 let-7b mimics 情况下，let-7b对荧光素酶活性的抑制作用随着浓度梯度的增加而增大，在 20nM let-7b 作用下，对荧光素酶活性的抑制作用即有统计学意义（p<0.001），其抑制效率达到 70%

上海交通大学博士学位论文中 AngII 在病理状态下分泌增加，所以认为 AngII 有可能参与上调血管外周脂肪中 ADRB3 蛋白表达和促炎症因子 OPN 的表达。因此，采用醛固酮(Aldo)、血管素 II（AngII）和去甲肾上腺素（NE）作为刺激因子，检测其对脂肪细胞中 ADRB OPN 蛋白表达的影响。通过刺激分化成熟的脂肪细胞，发现醛固酮（Aldo）和血管紧张素 II（Ang II能引起脂肪细胞表达 ADRB3 蛋白和 OPN 蛋白，其中 Ang II 能够显著引起 ADRB OPN 表达的增加，醛固酮的作用不是很显著。去甲肾上腺素（NE）刺激成熟的细胞并没有引起 ADRB3 蛋白和 OPN 表达的升高（图 20 A B D）。说明 NE 和醛固非是引起 ADRB3 蛋白表达升高的主要因素，脂肪细胞中 ADRB3 和 OPN 蛋白的是有可能血管紧张素 II 引起的。


本文编号：3026757