伊伐布雷定对大鼠心肌细胞缺血再灌注损伤的保护作用及机制研究

发布时间：2021-02-10 07:31

　　研究背景绝大部分心跳骤停（Cardiac Arrest,CA）患者预后极差,美国出院存活率不足8%,而中国仅为1%。复苏后心功能障碍（Post-resuscitation Myocardial Dysfunction,PRMD）与复苏后早期死亡密切相关,但尚缺乏有效的治疗手段。尽管有研究支持PRMD患者接受β受体阻滞剂治疗可改善预后,但因其作用可能造成PRMD加重。因此寻找更安全有效的药物替代β受体阻滞剂迫在眉睫。前期研究显示伊伐布雷定（Ivabradine,IVA）在猪CPR模型中有心肌保护作用,可通过抗氧化应激保护线粒体功能等多种途径去改善心功能,然而IVA对缺血再灌注后心肌尤其是心肌细胞的影响及调控机制尚未报道。因此,本研究以体外缺血缺氧诱导心肌细胞损伤模型为基础,观察IVA对缺血再灌注后心肌细胞的保护作用,以线粒体功能紊乱和氧化应激功能异常为切入点,探讨AMPK/SIRT1/PGC-1α途径IVA对缺血再灌注后心肌能量代谢的调节及作用机制。研究目的通过心肌细胞体外研究,探讨IVA对缺血再灌注损伤后心肌的保护作用及是否与AMPK/SIRT1/PGC-1α途径相关。研究方法本实验是... 

【文章来源】：安徽医科大学安徽省

【文章页数】：64 页

【学位级别】：硕士

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能量代谢指标的比较

安徽医科大学硕士学位论文31增殖的影响；（B）流式细胞术检测对照组的细胞凋亡水平；（C）流式细胞术检测IRI组的细胞凋亡水平；（D）流式细胞术检测20μMIVA处理组的细胞凋亡水平（E）流式细胞术检测100μMIVA处理组的细胞凋亡水平。#表示与control组比较P＜0.05，##表示与control组比较P＜0.01；*表示与IRI组比较P＜0.05，**表示与IRI组比较P＜0.01Fig2:Thecomparisonofcellviabilityandapoptosis(A)EffectsoncellproliferationwhenH9c2cellswerepretreatedwithdifferentIVAconcentrationsfor2,12,and24hpriortoIRI,asassessedbytheCCK-8assay.(B)Flowcytometrytodetectthelevelofapoptosisinthecontrolgroup.(C)FlowcytometrytodetectthelevelofapoptosisintheIRIgroup.(D)Flowcytometrytodetecttheapoptosislevelinthe20μMIVAtreatmentgroup.(E)Flowcytometrytodetecttheapoptosislevelinthe100μMIVAtreatmentgroup.Comparedwiththecontrolgroup,#indicatesP<0.05,##indicatesP<0.01.ComparedwiththeIRIgroup,*indicatesP<0.05,**Pindicates<0.01.3.4IVA对缺血再灌注后心肌细胞线粒体形态的影响透射电子显微镜检查结果显示，IRI组心肌细胞结构严重受损，存在许多液泡样结构。线粒体变圆，肿胀，破碎甚至消失，与对照组相比，基质密度加深（图3A、B）。IVA组能够改善IRI诱导的线粒体结构损伤。100μMIVA组的线粒体仅有轻微溶胀的趋势，具有少许清澈透明的空泡，基质颜色变淡，双层膜相对完整（图3C、D）。图3IVA对缺血再灌注后H9c2细胞线粒体形态的影响（A）正常的线粒体形态;（B）IRI组的线粒体形态;（C）20μMIVA组的线粒体形态;（D）100μMIVA组的线粒体形态Fig3:EffectofIVAonmitochondrialmorphologyinH9c2cellsafterIRI.

安徽医科大学硕士学位论文33图4IVA后IVA对H9c2细胞中ATP，ADP，AMP和NAD+含量的影响（A）HPLC色谱图（标准样品）；（B）HPLC色谱图（H9c2细胞样品）；（C）ATP，ADP，AMP和NAD+的标曲；（D）IVA对IRI后H9c2细胞中ATP，ADP，AMP和NAD+含量的影响；（E）IVA对AMP/ATP比的影响。与对照组相比，＃表示P<0.05，##表示P<0.01。与IRI组相比，*表示P<0.05，**表示P<0.01。Fig4:EffectsofIVAontheATP,ADP,AMP,andNAD+contentsinH9c2cellsafterIRI.(A)HPLCchromatogramofthestandardsample.(B)HPLCchromatogramoftheH9c2cellsample.(C)ThestandardcurveforATP,ADP,AMP,andNAD+.(D)TheeffectsofIVAontheATP,ADP,AMP,andNAD+contentsinH9c2cellsafterIRI.(E)TheeffectsofIVAontheAMP/ATPratio.Comparedwiththecontrolgroup,#Pindicates<0.05,##indicatesP<0.01.ComparedwiththeIRIgroup,*indicatesP<0.05,**indicatesP<0.01.

【参考文献】：
期刊论文
[1]生物能量分析仪在肿瘤细胞生物能量代谢中的应用研究[J]. 汪春龙,郭苗苗,吴艺琦,陈福红,蓝林华,徐翠翠,楼康诚,沈恺,徐浩,余晓敏,刘永章,吕斌,谢红莉.  中国细胞生物学学报. 2016(09)
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本文编号：3027015