宫内慢性缺氧对成年雄性大鼠心肌细胞eNOS表达及磷酸化的影响

发布时间：2021-02-12 07:56

　　目的宫内慢性缺氧将导致胎儿生长受限,从而诱发成年期心血管疾病。我们通过建立宫内慢性缺氧大鼠模型,研究其对于成年期雄性心肌细胞形态学、心肌胶原纤维沉积、内皮型一氧化氮合酶（endothelial Nitric Oxide Synthase,eNOS）表达及eNOS磷酸化水平的影响,探讨宫内慢性缺氧导致成年期雄性心血管疾病的可能机制。方法健康SD孕鼠12只,于孕期第7天随机分为两组:缺氧组（H组）及对照组（C组）。缺氧组放置于低氧舱内,低氧舱内氧气浓度控制在（10.0±0.5）%,每日维持8小时。对照组同样放置于低氧舱内,但通入空气,维持氧气浓度与舱外大气相同,每日维持时长相同。重复上述过程直至孕鼠分娩（妊娠第21天）。孕鼠分娩后,使用随机数字表法选取子代雄性大鼠各6只,正常喂养至11月龄。苏木精-伊红染色法（Hematoxylin-eosin Staining,HE）观察及测量成年雄性大鼠心肌细胞直径;马松（Masson）染色法观察及测量胶原纤维面积比例;实时定量荧光PCR法（Real Time PCR）检测成年雄性大鼠心肌细胞eNOS mRNA表达;蛋白质印迹法（Western Blo... 

【文章来源】：福建医科大学福建省

【文章页数】：48 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

部分标本HE染色显微镜下对比（400倍）

图 2.3 部分心肌组织 Masson 染色显微镜下形态（400 倍）表 2.2 两组之间胶原纤维的面积百分比组别 胶原纤维的面积百分比（%）（ x±s）对照组（C） 5.9828±2.4442缺氧组（H） 5.8604±1.6715：两组之间差异无统计学意义。（F=0.23，P＞0.05）01234567对照组（C） 缺氧组（H）胶原纤面积维分百（比%）

eal Time PCR 法检测 eNOS mRNA 表达结果NA 完整性检测 Trizol 提取 RNA，总 RNA 提取完成后检测 OD260/OD280，结0/OD280 均处于 1.8~2.0，纯度满足实验要求。RNA 电泳（琼脂，其结果显示 RNA 完整性良好，未见明显降解（见图 2.5） 。

【参考文献】：
期刊论文
[1]《中国心血管病报告2016》概要[J]. 陈伟伟,高润霖,刘力生,朱曼璐,王文,王拥军,吴兆苏,李惠君,顾东风,杨跃进,郑哲,蒋立新,胡盛寿.  中国循环杂志. 2017(06)
[2]产前缺氧降低7月龄子鼠心脏舒张功能及其相关分子机制[J]. 陈幼芳,杜心清,吴淳淳,林惠通,林文东.  中华高血压杂志. 2016(12)
[3]基于“二胎”再育趋势的产科安全影响因素分析及对策探讨[J]. 陈淑芳,张晨,陈焱,程蔚蔚.  上海交通大学学报(医学版). 2016(05)
[4]eNOS在EPO调节慢性缺氧心肌细胞线粒体生物合成中的作用机制研究[J]. 秦川,陈林,肖颖彬.  重庆医学. 2015(16)
[5]慢性宫内缺氧对子代大鼠心脏诱导型一氧化氮合酶、血清内皮素1的影响[J]. 应红安,黄子扬,王振华.  中国动脉硬化杂志. 2011(08)
[6]eNOS磷酸化与酶活性及中药介入[J]. 史海霞,刘俊,薛永亮,俞林花,聂绪强,卞卡.  中国药理学通报. 2011(03)
[7]宫内慢性缺氧对子代大鼠血管内皮功能的影响[J]. 王振华,黄子扬,吕国荣.  中国动脉硬化杂志. 2010(09)

硕士论文
[1]慢性间歇性缺氧对孕鼠子代鼠动脉粥样硬化病变及Caveolin-1的影响[D]. 林辉煌.福建医科大学 2013



本文编号：3030518