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IL-18调控血管平滑肌细胞TNF-α、IL-6、IL-8的表达

发布时间:2021-02-26 14:01
  目的初步探讨白细胞介素(IL)-18调控血管平滑肌细胞(VSMC)中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-6、IL-8表达及其机制。方法以不同浓度的IL-18(3、10、30、100 ng/ml)处理VSMC,采取不同时间,通过Real-time PCR分析TNF-α、IL-6、IL-8 mRNA水平的表达;ELISA方法分析TNF-α、IL-6、IL-8蛋白水平表达;用特异性抑制剂分别阻断p38和AKT信号通路,通过Western blot分析这2条信号途径激活情况及对TNF-α、IL-6、IL-8蛋白表达的影响。结果不同浓度的IL-18能促使VSMC中TNF-α、IL-6、IL-8 mRNA水平表达升高,表现出剂量依赖效应;IL-18(30 ng/ml)以时间依赖的方式增加3种细胞因子的mRNA及蛋白水平表达。Western blot结果显示IL-18能够激活p38和AKT;特异性阻断剂分析显示:IL-18调控TNF-α、IL-6、 IL-8的表达部分依赖该2条信号途径的激活。结论 IL-18部分依赖p38和AKT信号通路的活化从而促使VSMC中TNF-α、IL-6、 IL-8 3种... 

【文章来源】:安徽医科大学学报. 2020,55(12)北大核心

【文章页数】:5 页

【文章目录】:
1 材料与方法
    1.1 材料与试剂
    1.2 引物
    1.3 方法
        1.3.1 细胞培养
        1.3.2 Real-time PCR检测TNF-α、IL-6、 IL-8的mRNA水平表达
        1.3.3 ELISA法分析TNF-α、IL-6、IL-8蛋白水平表达
        1.3.4 Western blot分析IL-18的信号通路
    1.4 统计学处理
2 结果
    2.1 IL-18对VSMC细胞中TNF-α、IL-6、 IL-8的mRNA水平表达的影响
    2.2 IL-18对VSMC细胞中TNF-α、IL-6、 IL-8的蛋白水平表达的影响
    2.3 IL-18对VSMC细胞中p38MAPK及PI3K/AKT信号通路的影响
    2.4 IL-18刺激VSMC后TNF-α、IL-6、 IL-8的蛋白的表达水平与p38MAPK及AKT信号通路相关性
3 讨论



本文编号:3052690

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