CD137-CD137L轴通过CyPA调节ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化的研究

发布时间：2021-03-02 12:22

　　目的：探讨CD137-CD137L轴通过调节CyPA在ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块形成、进展中的作用及机制。方法：采用ApoE-/-小鼠颈动脉硅胶圈植入法快速制作动脉粥样斑块模型,分别利用抗CD137、抗CD137L激活或抑制CD137-CD137L轴,在激动组和抑制组中分别加用CyPA慢病毒抑制载体、CyPA慢病毒过表达载体,将各组小鼠斑块进行病理形态学分析,并用RT-PCR,免疫组化、ELASA、Western Blot、流式细胞术分别检测斑块、小鼠脾脏淋巴细胞、主动脉血管平滑肌细胞中CyPA mRNA和蛋白表达水平。结果：（1）与正常对照组相比,手术组小鼠血清TC、TG、LDL-C显著升高,HDL-C显著降低。（2）正常对照组小鼠颈动脉内膜较为光整平滑,血管管壁呈类透明状；未见斑块和脂纹形成,管壁弹力板显示完整。术后ApoE-/-动脉粥样斑块模型小鼠颈动脉管壁则见明显的斑块形成,板块中见大量的泡沫细胞、脂质成分、胆固醇结晶,弹力板出现变性、甚至断裂。术后给予anti-CD137刺激剂后斑块更显著,抑制CyPA后斑块明显减少。术后给予anti-CD137L抑制剂后斑块较正常对... 

【文章来源】：江苏大学江苏省

【文章页数】：97 页

【学位级别】：博士

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摘要
ABSTRACT
-/-小鼠动脉粥样硬化的调节作用">第一部分 CD137-CD137L轴对ApoE^-/-小鼠动脉粥样硬化的调节作用
    1 前言
        1.1 CD137的分子生物学特性
        1.2 配体CD137L的分子生物学特性
        1.3 CD137-CD137L表达的调节
        1.4 动脉粥样硬化的炎性学说
        1.5 CD137-CD137L在动脉粥样硬化炎症反应中的作用
    2 材料
        2.1 仪器
        2.2 试剂及材料
        2.3 实验动物
        2.4 高脂高胆固醇（Western diet）饲料
    3 方法
        3.1 动物分组
        3.2 动脉斑块模型制作
        3.3 病理取材
        3.4 血脂测定
        3.5 标本的处理
        3.6 苏木素-伊红（HE）染色
        3.7 血清sCD137水平测定
        3.8 统计分析
    4 结果
        4.1 sCD137在动脉粥样硬化进展中的表达水平
        4.2 体内刺激/阻断CD137-CD137L轴对斑块形成的影响
    5. 讨论
-/-小鼠动脉粥样硬化的机制研究">第二部分 CD137-CD137L通过CyPA调节ApoE^-/-小鼠动脉粥样硬化的机制研究
    1 前言
        1.1 CyPA与动脉粥样硬化的关系
            1.1.1 CyPA对单核/巨唆细胞的作用
            1.1.2 CyPA对内皮细胞的作用
            1.1.3 CyPA对血管平滑肌的作用
            1.1.4 CyPA与动脉粥样硬化斑块稳定性的关系
        1.2 CyPA 与 CD137-CD137L 轴的关系
            1.2.1 CyPA与AS炎性反应的关系
            1.2.2 CD137-CD137L轴与AS炎性反应的关系
    2 材料
        2.1 主要仪器
        2.2 试剂及材料
        2.3 实验动物
    3 方法
        3.1 实验动物分组
        3.2 动脉斑块模型制作
        3.3 病理取材
        3.4 苏木素-伊红（HE）染色
        3.5 CyPA免疫组化染色
        3.6 定量PCR检测相关基因表达
        3.7 Western blot法检测相关蛋白表达
        3.8 血清CyPA水平测定
-/-小鼠脾脏淋巴细胞制备">        3.9 ApoE^-/-小鼠脾脏淋巴细胞制备
        3.10 间接免疫荧光流式细胞术检测CyPA的表达
        3.11 平滑肌原代细胞培养
        3.12 统计学分析
    4 体内实验结果
-/-小鼠CyPA表达的影响">        4.1 CD137-CD137L相互作用对ApoE^-/-小鼠CyPA表达的影响
-/-小鼠动脉硬化斑块形成">        4.2 CD137-CD137L轴通过CyPA调节ApoE^-/-小鼠动脉硬化斑块形成
    5 体外实验结果
        5.1 体外刺激CD137-CD137L轴影响淋巴细胞CyPA mRNA和蛋白的表达
        5.2 体外阻断CD137-CD137L轴影响淋巴细胞CyPA mRNA和蛋白的表达
        5.3 体外刺激CD137-CD137L轴影响平滑肌细胞CyPA mRNA和蛋白的表达
    讨论
参考文献
结论
展望
综述
    参考文献
常用缩略词对照表
致谢
攻读博士学位期间的科研成果


【参考文献】：
期刊论文
[1]MRP8和亲环素A在喉鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义[J]. 冯明亮,周建荣,魏莲枝,余林,董浦江.  临床耳鼻咽喉头颈外科杂志. 2011(18)
[2]细胞亲环素A对单核来源泡沫细胞功能的影响[J]. 戎梦瑶,朵瑞雪,朱平,王聪华,汪莉,樊春梅,王彦宏.  细胞与分子免疫学杂志. 2011(05)
[3]亲环素A和CD147在皮肤衰老过程中表达的研究（英文）[J]. 李吉,谢红付,易梅,彭乐芳,雷丹,陈翔,简丹.  中南大学学报(医学版). 2011(03)



本文编号：3059253