Prdx1通过ROS诱导的MAPK通路在心肌缺血/再灌注损伤中抑制心肌细胞凋亡

发布时间：2021-03-15 09:26

　　目的研究过氧化物还原酶1（peroxiredoxin 1,Prdx1）在大鼠心肌缺血/再灌注损伤（myocardial ischemia/reperfusion injury,MIRI）模型中的表达变化,并分析其通过ROS诱导的MAPK通路在MIRI模型中对心肌细胞凋亡的影响。方法成年雄性清洁级SD（Sprague Dawley）大鼠64只,随机分为8组,假手术组作为对照,实验组包括:缺血30 min后再灌注0 h,2 h,4 h,6 h,8 h,12 h,24 h组。采用结扎-松开冠脉左前降支的方法,构建大鼠缺血/再灌注（Ischemia/Reperfusion,I/R）损伤模型;采用原代心肌细胞及H9c2细胞缺氧复氧（Hypoxia/Reoxygenation,H/R）刺激,构建体外模型。应用心电图（electrocardiogram,ECG）验证在体模型构建是否成功;采用蛋白免疫印迹（Western Blot,WB）、免疫组织化学（Immunohistochemistry,IHC）检测Prdx1等蛋白表达变化;采用免疫荧光染色（Immunofluorescence,IF）检测Pr... 

【文章来源】：南通大学江苏省

【文章页数】：61 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
第一章 绪论
    1.1 课题来源、研究的目的和意义
    1.2 国内外研究概况
        1.2.1 国外研究概况
        1.2.2 国内研究概况
    1.3 论文的主要研究内容
第二章 材料与方法
    2.1 研究资料及仪器设备
        2.1.1 实验动物
        2.1.2 主要试剂
        2.1.3 主要仪器
    2.2 实验方法
        2.2.1 构建大鼠心肌缺血/再灌注损伤模型
        2.2.2 原代心肌细胞的提取
        2.2.3 细胞的培养、刺激及转染
        2.2.4 蛋白免疫印迹实验（western blot）分析
        2.2.5 免疫组化
        2.2.6 免疫荧光
        2.2.7 TUNEL检测细胞凋亡
        2.2.8 CCK8检测细胞活性
        2.2.9 细胞活性氧检测
        2.2.10 流式细胞术检测细胞凋亡
        2.2.11 数据处理和统计学分析
第三章 结果
    3.1 大鼠心肌缺血/再灌注损伤模型验证
    3.2 Prdx1在大鼠心肌缺血/再灌注损伤模型中的表达变化
    3.3 Prdx1在大鼠心肌缺血/再灌注损伤模型中的定位变化
    3.4 Prdx1表达定位于大鼠心肌组织
    3.5 大鼠原代心肌细胞形态学观察
    3.6 大鼠原代心肌细胞鉴定
    3.7 构建细胞缺氧复氧模型
    3.8 Prdx1与缺血/再灌注诱导的细胞凋亡相关
    3.9 MAPK通路对心肌细胞凋亡的调节
    3.10 Prdx1通过MAPK通路调节心肌细胞的凋亡
    3.11 ROS是MAPK通路的上游调节因子
第四章 讨论
    4.1 心肌缺血/再灌注损伤与ROS诱导的细胞凋亡
    4.2 心肌缺血/再灌注损伤与MAPK通路
    4.3 Prdx1与心肌缺血/再灌注损伤
第五章 结论
参考文献
英文缩写词表
综述
    综述参考文献
在攻读硕士学位期间公开发表的论文
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]甲基原薯蓣皂苷对心肌细胞内钙及ATP酶功能的影响及其机制[J]. 宁宗,李贻奎,张荣利.  中国中药杂志. 2010(01)



本文编号：3083952