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血管平滑肌细胞特异性SCAP基因敲除致胚胎心脏流出道发育异常的研究

发布时间:2021-03-25 16:04
  目的:固醇调节元件结合蛋白裂解激活蛋白(SCAP)又称胆固醇敏感器,在机体内胆固醇调节中起重要作用。以往研究也主要在脂代谢方面,近年来,对该基因在发育中的认识进一步加深,特别是胚胎时期引起各种器官异常改变。本研究中,主要探讨了该基因缺失在转基因小鼠胚胎心脏流出道中的影响及机制。方法:本研究选择了采用Cre/loxp系统构建血管平滑肌细胞特异性表达Cre酶的(SM22-Cre)敲除SCAP的转基因小鼠作为工具鼠,包括SCAPflox/flox和SM22-Cre+/-小鼠。将雌性SCAPflox/flox与雄性SM22-Cre+/-小鼠交配,得到SM22-Cre;SCAPflox/+,即实验所需的血管平滑肌特异性SCAP敲除小鼠。进一步行DNA鉴定,再筛所需基因型。将得到的SM22-Cre/SCAPflox/+小鼠进行交配,于小鼠胚胎期按时间点E9.5、E10.5、E11.5、E12.5d、E13.5、E14.5d、E16.5d、E18.5d取胚胎鼠尾鉴定,统... 

【文章来源】:重庆医科大学重庆市

【文章页数】:61 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

血管平滑肌细胞特异性SCAP基因敲除致胚胎心脏流出道发育异常的研究


血管平滑肌细胞特异性敲除SCAP小鼠交配方案

基因型鉴定,条带,小鼠,血管平滑肌细胞


图 1 血管平滑肌细胞特异性敲除 SCAP 小鼠交配方案ating protocol in mice with SCAP knockout by vascular smcellsPCR 方法行基因型鉴定 PCR 鉴定小鼠基因型,在下图中分别可见各中基因型小鼠CAP WT 条带可见 SCAP 在 400bp 处,SCAPflox/+SCAP 条带显,SCAPflox/flox条带显示在 450bp 处。在 B 图中 Cre-/- e+/- 条带在 324bp 和 100bp 两处均有显像。(图 3)

心脏,肝脏,纯合子,胚胎


重庆医科大学硕士研究生学位论文组小鼠中,心脏 SCAP 的表达有明显下降超过 70%,与对照组相比,差学意义,而在肝脏和肺组织中,SCAP 的表达在两组中无差异,说明 具有血管平滑肌的特异性。(图 4)


本文编号:3099940

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