褪黑素对动脉粥样硬化兔心肌细胞凋亡的影响及其机制的研究
发布时间:2021-04-20 07:03
目的探讨褪黑素(melatonin)对实验性动脉粥样硬化兔心肌细胞凋亡的保护作用及其可能的分子机制。方法(1)动脉粥样硬化兔模型:普通级纯种新西兰大耳白兔随机分为3组,正常组:饲喂普通饲料;模型组:饲喂高脂饲料(普通饲料+1%胆固醇+5%猪油);褪黑素组:饲喂高脂饲料的同时MLT灌胃10 mg/(kg·d)治疗。纯种大耳白兔适应性饲养一周后,采用高脂饮食诱导造模,同时给予褪黑素药物治疗。于12周后处死进行采血,检测血清中血脂等指标。取动脉进行油红染色,检测脂质斑块形成情况;取心脏组织,石蜡包埋后HE染色和Masson染色观察心肌组织中细胞质细胞核染色情况以及胶原纤维的分布变化;原位末端标记法(TUNEL)观察心肌组织细胞凋亡情况;免疫组化(immunohistochemistry)检测CHOP,Caspase-12等内质网应激(endoplasmic reticulum stress)相关蛋白的表达水平。此外,为探讨其可能的分子机制,Western blot法检测凋亡相关蛋白(Caspase-9,Caspase-3,bcl-2,bax)的表达情况以及内质网应激相关蛋白(GRP78,CH...
【文章来源】:安徽医科大学安徽省
【文章页数】:59 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
英文缩略词对照表(Abbreviation)
摘要
Abstract
1 前言
2 材料与方法
2.1 做实验所需器材
2.2 AS模型的建立
2.3 制作标本
2.4 检测血清指标
2.5 石蜡切片
2.6 HE染色
2.7 Masson染色
2.8 检测心肌细胞凋亡(TUNEL)法
2.9 免疫组织化学(IHC)
2.10 Western Blot
2.11 细胞培养
2.12 Hoechst33258染色
2.13 MTT法
2.14 Westernblot(心肌细胞)
2.15 统计学处理
3 实验结果
3.1 油红染色法检测斑块形成
3.2 血脂统计结果
3.3 HE染色结果
3.4 MASSON染色结果
3.5 TUNEL法检测心肌细胞凋亡
3.6 兔心肌组织Caspase-12,CHOP表达变化
3.7 褪黑素对动脉粥样硬化兔心肌细胞凋亡信号相关蛋白的影响
3.8 褪黑素对动脉粥样硬化兔心肌细胞ERS相关蛋白表达的影响
3.9 不同浓度PA对心肌细胞H9C2的影响
3.10 棕榈酸对H9c2细胞凋亡的影响
3.11 褪黑素对棕榈酸处理的H9c2细胞ERS相关蛋白的影响
4 讨论
5 结论
参考文献
附录一 个人简历
附录二 致谢
综述
参考文献
本文编号:3149214
【文章来源】:安徽医科大学安徽省
【文章页数】:59 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
英文缩略词对照表(Abbreviation)
摘要
Abstract
1 前言
2 材料与方法
2.1 做实验所需器材
2.2 AS模型的建立
2.3 制作标本
2.4 检测血清指标
2.5 石蜡切片
2.6 HE染色
2.7 Masson染色
2.8 检测心肌细胞凋亡(TUNEL)法
2.9 免疫组织化学(IHC)
2.10 Western Blot
2.11 细胞培养
2.12 Hoechst33258染色
2.13 MTT法
2.14 Westernblot(心肌细胞)
2.15 统计学处理
3 实验结果
3.1 油红染色法检测斑块形成
3.2 血脂统计结果
3.3 HE染色结果
3.4 MASSON染色结果
3.5 TUNEL法检测心肌细胞凋亡
3.6 兔心肌组织Caspase-12,CHOP表达变化
3.7 褪黑素对动脉粥样硬化兔心肌细胞凋亡信号相关蛋白的影响
3.8 褪黑素对动脉粥样硬化兔心肌细胞ERS相关蛋白表达的影响
3.9 不同浓度PA对心肌细胞H9C2的影响
3.10 棕榈酸对H9c2细胞凋亡的影响
3.11 褪黑素对棕榈酸处理的H9c2细胞ERS相关蛋白的影响
4 讨论
5 结论
参考文献
附录一 个人简历
附录二 致谢
综述
参考文献
本文编号:3149214
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