IL-5通过JAK2/STAT3途径上调THP-1巨噬细胞ABCA1的表达

发布时间：2021-04-25 03:21

　　目的:白细胞介素-5（IL-5）被证实能对抗动脉粥样硬化（As）发生发展,其具体作用机制尚未被完全认识。本研究旨在探讨IL-5能否通过JAK2/STAT3途径上调THP-1巨噬细胞ATP结合盒转运体A1（ABCA1）表达。方法:将THP-1细胞诱导转变成泡沫细胞,经不同浓度的IL-5处理相同时间或同一浓度IL-5（0.15 ng/mL）处理不同时间（0,6,12,24,48 h）,用油红O染色观察细胞内脂滴多少,高效液相色谱法测定细胞内胆固醇含量,液体闪烁计数法检测细胞内胆固醇流出率;Western blot测定细胞内ABCA1蛋白含量,实时定量PCR检测ABCA1 mRNA水平。IL-5或抗IL-5抗体处理细胞24小时,Western blot检测细胞内磷酸化的JAK2、STAT3及总蛋白水平。JAK2和STAT3抑制剂或转染JAK2和STAT3 siRNA对IL-5作用下的细胞处理24小时,检测细胞内ABCA1、JAK2和磷酸化STAT3蛋白水平。结果:IL-5能够上调THP-1巨噬细胞ABCA1蛋白及m RNA表达水平,且呈现出一定时间和剂量依赖性。进一步实验证实IL-5通过激活... 

【文章来源】：南华大学湖南省

【文章页数】：59 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
主要英文缩略语索引
第1章 绪论
第2章 实验材料
    2.1 主要试剂与抗体
    2.2 主要仪器与器材
第3章 实验方法
    3.1 THP-1 细胞培养与处理
    3.2 氧化低密度脂蛋白的制备及鉴定
    3.3 油红O染色观察细胞脂滴
    3.4 THP-1 细胞总蛋白提取
    3.5 提取RNA和实时定量PCR
    3.6 蛋白定量及蛋白免疫印迹（Western blot）检测ABCA1、总的JAK2、STAT3蛋白及磷酸化的JAK2、STAT3蛋白含量
    3.7 JAK2、STAT3小干扰RNA（siRNA）转染THP-1 巨噬细胞
    3.8 高效液相色谱法检测 THP-1 巨噬细胞胆固醇含量
    3.9 液体闪烁计数法检测细胞内胆固醇流出
    3.10 统计学分析
第4章 实验结果
    4.1 IL-5 促进THP-1 巨噬细胞胆固醇流出，减少细胞内胆固醇蓄积
    4.2 I L - 5 上调T H P - 1 巨噬细胞A B C A 1 蛋白和m R N A表达
    4.3 IL-5 影响JAK2及STAT3的活化
    4.4 STAT3与IL-5 诱导ABCA1表达相关
    4.5 JAK2/STAT3信号通路参与IL-5 上调ABCA1表达
第5章 讨论
第6章 结论
参考文献
文献综述
    参考文献
硕士期间发表论文
致谢
基金


【参考文献】：
期刊论文
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博士论文
[1]NF-κB-SREBPs途径介导巨噬细胞胆固醇流出和炎症因子的产生[D]. 赵国军.南华大学 2013



本文编号：3158599