RAS/ERK通路介导AngⅡ调控血管平滑肌细胞增殖的生物钟机制研究

发布时间：2021-05-12 13:34

　　目的:探讨AngⅡ诱导VSMCs内生物钟基因Per1、Per2表达,通过激活RAS/ERK通路,从而促进Cyclin E基因的表达,影响血管平滑肌细胞的异常增殖,进而影响血压昼夜节律。方法:组织贴壁法提取SD大鼠原代血管平滑肌细胞,用50%血清刺激2 h进行细胞授时,记为Control组,加用100 nM AngⅡ记为AngⅡ组,分别加入抑制剂VAL、U0126和SCH772984记为抑制剂组。于CT 3、CT 7、CT 11、CT 15、CT 19、CT 23分别取样,采用RT-PCR技术检测各组Per1、Per2、Cyclin E基因的表达;采用WB技术分别检测各组Per1、Per2、RAS、MEK、p-MEK、ERK、p-ERK、Cyclin E蛋白的表达。采用流式细胞术检测细胞周期分布,MTT法检测细胞活力,SiRNA转染技术沉默Per1、Per2基因后,采用RT-PCR技术检测各组Cyclin E基因的表达;采用WB检测各组Cyclin E、RAS、MEK、p-MEK、ERK、p-ERK蛋白表达变化。结果:（1）AngⅡ能够诱导VSMCs异常增殖,且存在剂量效应,这与诱导Cy... 

【文章来源】：皖南医学院安徽省

【文章页数】：73 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
前言
材料与方法
    1 试剂与仪器
    2 大鼠原代血管平滑肌细胞的培养与鉴定
    3 细胞分组
    4 荧光实时定量PCR实验
    5 免疫印迹实验
    6 细胞增殖实验
    7 细胞周期检测
    8 SiRNA转染实验
    9 统计学分析
结果
讨论
总结
结论
参考文献
综述
    参考文献
作者简介及读研期间主要科研成果
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]Regulation of Circadian Genes by the MAPK Pathway:Implications for Rapid Antidepressant Action[J]. Xin-Ling Wang,Kai Yuan,Wen Zhang,Su-Xia Li,George Fu Gao,Lin Lu.  Neuroscience Bulletin. 2020(01)
[2]缬沙坦/氨氯地平复方制剂择时用药对非杓型高血压患者血压昼夜节律的影响[J]. 栾家杰,刘晓云,张文,许金红,邢文,王安才,宋建国.  中国药理学通报. 2015(03)
[3]大鼠血管平滑肌细胞的培养和鉴定[J]. 张浩,王志维,吴红兵,胡小平,任宗力,李罗成,周桢,胡志鹏,李柏军.  武汉大学学报(医学版). 2014(03)

硕士论文
[1]缬沙坦对AngⅡ诱导血管平滑肌细胞收缩及增殖调控作用的生物钟机制研究[D]. 杨魁.皖南医学院 2019
[2]缬沙坦调控自发性高血压大鼠血压昼夜节律的生物钟机制研究[D]. 王亚芹.皖南医学院 2017



本文编号：3183506