急性心肌梗死患者血浆外泌体miRNA微阵列表达谱研究
发布时间:2021-05-12 16:32
背景与目的:稳定性冠心病(Stable Coronary Artery Disease,SCAD)是冠心病(Coronary Heart Disease,CHD)中最常见的类型,而SCAD稳定斑块的失稳定极易导致急性心肌梗死(Acute Myocardial Infarction,AMI)的发生,且预后较差。外泌体(Exosome)是由多种活细胞分泌的纳米级囊泡,并且通过转移微小RNA(miRNA)等生物分子介导着细胞间的信号交流。由于外泌体具有脂质双层结构,使得miRNA等分子能够稳定存在于人体内绝大部分的体液中。本研究初步探讨血浆外泌体miRNA对SCAD进展为AMI早期预测的价值。材料方法:(1)选择6例(3男3女)AMI患者及6例(3男3女)SCAD患者进行血浆外泌体miRNA提取,并对所有超速离心提取的外泌体进行透射电镜观察、蛋白质印迹和nanosight来明确外泌体的纯化效果。(2)对所选样本进行miRNA微阵列分析,并且进一步采用GeneOntology(GO)及一些经典通路对具有显著表达差异(p<0.05)外泌体miRNA的靶基因功能进行预测。(3)我们根据芯片分...
【文章来源】:宁波大学浙江省
【文章页数】:56 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
摘要
abstract
引言
1 材料与方法
1.1 研究对象入组及血标本采集
1.1.1 研究对象入组标准
1.1.2 外周血标本采集
1.2 超速离心法提取血浆外泌体及特征鉴定
1.2.1 血浆外泌体超速离心法提取
1.2.2 血浆外泌体的鉴定
1.3 外泌体RNA提取及miRN 表达谱分析
1.3.1 RNA提取,标记和杂交
1.3.2 miRNA表达谱分析
1.4 外泌体mRNA靶基因的预测及功能富集分析、通路富集分析
1.5 qPCR验证外泌体miRNA芯片结果
1.6 统计学分析
2 结果
2.1 基本情况
2.2 外泌体鉴定结果
2.3 外泌体miRNA微阵列分析结果
2.4 外泌体miRNA靶基因预测及功能富集分析、通路富集分析结果
2.5 qPCR验证miRNA-1915-3p、miRNA-4507和miRNA-3656结果
2.6 AMI 患者血浆外泌体miRNA与临床特征的相关性分析结果
3 讨论
3.1 AMI患者血浆外泌体miRNA表达谱的改变
3.2 外泌体miRNA作为AMI的生物标志物
3.3 miRNA-1915-3p、miRNA-4507和miRNA-3656在AMI中的作用
3.4 外泌体miRNA靶基因功能、信号通路分析
3.4.1 RAS信号通路和心脏重构/心脏修复
3.4.2 MAPK信号通路和心脏重构/心脏修复
3.4.3 Wnt信号通路和心脏重构/心脏修复
3.4.4 神经生长因子信号通路和心脏重构/心脏修复
3.4.5 活化成纤维细胞生长因子受体家族下游信号通路和心脏重构/心脏修复
3.5 血浆外泌体形态和直径分布
4 结论
5 创新与不足
参考文献
【参考文献】:
期刊论文
[1]急性心肌梗死患者血清miR-208对血小板功能、炎症反应及心肌损伤程度的影响[J]. 曾德银,刘茜. 海南医学院学报. 2018(06)
[2]氯吡格雷与阿托伐他汀对急性心肌梗死患者的疗效及其对血小板各指标和半胱氨酸代谢的影响[J]. 李焕昌. 抗感染药学. 2018(01)
[3]《中国心血管病报告2017》概要[J]. 陈伟伟,高润霖,刘力生,朱曼璐,王文,王拥军,吴兆苏,李惠君,顾东风,杨跃进,郑哲,蒋立新,胡盛寿. 中国循环杂志. 2018(01)
[4]外泌体源性微小RNA在疾病诊治中的研究现状[J]. 李汉成,周玉婷,李婵,区锦莹,莫志贤. 中国临床药理学杂志. 2017(24)
[5]外泌体生成和分泌机制的研究进展[J]. 赵越,王超,陈和忠. 解放军医学杂志. 2017(12)
[6]补充外源性神经生长因子对大鼠心肌梗死后延迟再灌注的影响[J]. 刘洋,张绍敏,孙春丽,吴锦晖. 生物医学工程学杂志. 2015(06)
[7]硝酸异戊酯与硝酸甘油在老年急性心肌梗死患者急救治疗中的应用效果比较[J]. 康忠良. 实用心脑肺血管病杂志. 2015(12)
[8]稳定性冠心病治疗策略进展[J]. 刘如,袁晋青. 中国介入心脏病学杂志. 2015(03)
[9]不稳定型心绞痛患者循环microRNA对神经生长因子通路的靶向调节作用及其功能调控网络[J]. 李晶津,陈红,任景怡. 北京大学学报(医学版). 2014(06)
[10]稳定性冠心病诊治策略的选择:欧美指南给我们的提示[J]. 张永珍,高炜. 北京大学学报(医学版). 2014(06)
本文编号:3183746
【文章来源】:宁波大学浙江省
【文章页数】:56 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
摘要
abstract
引言
1 材料与方法
1.1 研究对象入组及血标本采集
1.1.1 研究对象入组标准
1.1.2 外周血标本采集
1.2 超速离心法提取血浆外泌体及特征鉴定
1.2.1 血浆外泌体超速离心法提取
1.2.2 血浆外泌体的鉴定
1.3 外泌体RNA提取及miRN 表达谱分析
1.3.1 RNA提取,标记和杂交
1.3.2 miRNA表达谱分析
1.4 外泌体mRNA靶基因的预测及功能富集分析、通路富集分析
1.5 qPCR验证外泌体miRNA芯片结果
1.6 统计学分析
2 结果
2.1 基本情况
2.2 外泌体鉴定结果
2.3 外泌体miRNA微阵列分析结果
2.4 外泌体miRNA靶基因预测及功能富集分析、通路富集分析结果
2.5 qPCR验证miRNA-1915-3p、miRNA-4507和miRNA-3656结果
2.6 AMI 患者血浆外泌体miRNA与临床特征的相关性分析结果
3 讨论
3.1 AMI患者血浆外泌体miRNA表达谱的改变
3.2 外泌体miRNA作为AMI的生物标志物
3.3 miRNA-1915-3p、miRNA-4507和miRNA-3656在AMI中的作用
3.4 外泌体miRNA靶基因功能、信号通路分析
3.4.1 RAS信号通路和心脏重构/心脏修复
3.4.2 MAPK信号通路和心脏重构/心脏修复
3.4.3 Wnt信号通路和心脏重构/心脏修复
3.4.4 神经生长因子信号通路和心脏重构/心脏修复
3.4.5 活化成纤维细胞生长因子受体家族下游信号通路和心脏重构/心脏修复
3.5 血浆外泌体形态和直径分布
4 结论
5 创新与不足
参考文献
【参考文献】:
期刊论文
[1]急性心肌梗死患者血清miR-208对血小板功能、炎症反应及心肌损伤程度的影响[J]. 曾德银,刘茜. 海南医学院学报. 2018(06)
[2]氯吡格雷与阿托伐他汀对急性心肌梗死患者的疗效及其对血小板各指标和半胱氨酸代谢的影响[J]. 李焕昌. 抗感染药学. 2018(01)
[3]《中国心血管病报告2017》概要[J]. 陈伟伟,高润霖,刘力生,朱曼璐,王文,王拥军,吴兆苏,李惠君,顾东风,杨跃进,郑哲,蒋立新,胡盛寿. 中国循环杂志. 2018(01)
[4]外泌体源性微小RNA在疾病诊治中的研究现状[J]. 李汉成,周玉婷,李婵,区锦莹,莫志贤. 中国临床药理学杂志. 2017(24)
[5]外泌体生成和分泌机制的研究进展[J]. 赵越,王超,陈和忠. 解放军医学杂志. 2017(12)
[6]补充外源性神经生长因子对大鼠心肌梗死后延迟再灌注的影响[J]. 刘洋,张绍敏,孙春丽,吴锦晖. 生物医学工程学杂志. 2015(06)
[7]硝酸异戊酯与硝酸甘油在老年急性心肌梗死患者急救治疗中的应用效果比较[J]. 康忠良. 实用心脑肺血管病杂志. 2015(12)
[8]稳定性冠心病治疗策略进展[J]. 刘如,袁晋青. 中国介入心脏病学杂志. 2015(03)
[9]不稳定型心绞痛患者循环microRNA对神经生长因子通路的靶向调节作用及其功能调控网络[J]. 李晶津,陈红,任景怡. 北京大学学报(医学版). 2014(06)
[10]稳定性冠心病诊治策略的选择:欧美指南给我们的提示[J]. 张永珍,高炜. 北京大学学报(医学版). 2014(06)
本文编号:3183746
本文链接:https://www.wllwen.com/yixuelunwen/xxg/3183746.html
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