金合欢素拮抗溶血卵磷脂诱导大鼠血管平滑肌细胞凋亡的分子机制研究

发布时间：2021-05-16 14:51

　　[目的]溶血卵磷脂（LysoPC）为氧化型低密度脂蛋白主要成分之一。我们前期研究表明,LysoPC可引起Ca2+超载促使人冠状动脉平滑肌细胞凋亡。本课题研究天然黄酮类化合物金合欢素（Acacetin）能否抑制LysoPC引起的动脉平滑肌细胞（VSMCs）因Ca2+超载导致的细胞凋亡并探讨其可能的分子机制。[方法]以体外分离培养的SD大鼠主动脉平滑肌细胞为研究对象,利用多种生物化学与分子生物学方法测定Acacetin对LysoPC引起的VSMCs内Ca2+超载与凋亡以及相关信号分子的影响。[结果]研究结果表明:与溶剂对照组比较,LysoPC能浓度依赖性的抑制VSMCs活力,其中30μM LysoPC作用VSMCs后,细胞凋亡率显著增加,引起ROS的水平升高,促凋亡蛋白Caspase-3和Bax表达水平显著上调,抗凋亡蛋白Bcl-2的表达明显减少。然而Acacetin并不影响LysoPC引起的细胞钙离子内流。Acacetin浓度依赖性地拮抗LysoPC引起的VSMCs活力降低、细胞凋亡和ROS水平增加,使促凋亡蛋白Caspase-3和Bax表达水平降低,抗凋亡蛋白Bcl-2的表达增加。Ac... 

【文章来源】：厦门大学福建省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：62 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 前言
    1.1 血管平滑肌细胞凋亡与心血管疾病
        1.1.1 血管平滑肌细胞凋亡与动脉粥样硬化
        1.1.2 血管平滑肌细胞凋亡与血管钙化
        1.1.3 血管平滑肌细胞凋亡与主动脉夹层
    1.2 调控血管平滑肌细胞凋亡的因素
        1.2.1 溶血卵磷脂与血管平滑肌细胞凋亡
        1.2.2 活性氧与血管平滑肌细胞凋亡
    1.3 金合欢素在心血管疾病中的应用
        1.3.1 抗炎作用
        1.3.2 抗心律失常作用
        1.3.3 心肌保护作用
    1.4 硕士课题拟解决的问题
第二章 材料及方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 细胞
        2.1.2 主要试剂
        2.1.3 主要设备及耗材
        2.1.4 主要溶液配制
    2.2 实验方法
        2.2.1 VSMCs的提取与分离
        2.2.2 VSMCs的传代培养与冻存
        2.2.3 VSMCs的鉴定
        2.2.4 细胞活力检测
        2.2.5 细胞凋亡检测
        2.2.6 细胞内钙离子测定
        2.2.7 细胞内活性氧含量测定
        2.2.8 Western blot方法检测细胞蛋白表达水平
        2.2.9 siRNA细胞转染实验
    2.3 数据统计分析
第三章 实验结果
    3.1 VSMCs的形态学观察及免疫荧光鉴定
    3.2 Acacetin对LysoPC引起的VSMCs活力降低的影响
    3.3 Acacetin对LysoPC诱导的VSMCs凋亡的影响
    3.4 Acacetin对LysoPC引起的VSMCs Ca~(2+)超载及ROS水平增加的影响
    3.5 Acacetin对LysoPC引起的VSMCs抗氧化酶表达降低的影响
    3.6 Acacetin对抗氧化调节因子Nrf2的影响
    3.7 沉默Nrf2对Acacetin抗氧化作用的影响
    3.8 沉默Nrf2对Acacetin抗凋亡作用的影响
第四章 讨论
附录1 英文缩略词中英文注释表
参考文献
攻读硕士期间科研成果
致谢



本文编号：3189890