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ACSL1影响甘油三酯机制的研究

发布时间:2021-05-22 03:45
  研究背景和目的本课题组在前期临床研究中发现急性心肌梗死(AMI)患者外周血白细胞中长链酰基-辅酶A合成酶1(ACSL1基因)高表达可以作为心肌梗死诊断的分子标记物。AMI患者血浆甘油三酯水平显著高于健康人,我们设想,ACSL1基因高表达,升高了甘油三酯的水平,这是ACSL1基因促进AMI的发病机制之一,本研究拟采用细胞学研究手段,明确我们的设想。研究长链酰基-辅酶合成酶1(ACSL1)基因对脂代谢的影响及机制。方法本研究通过培养健康人的肝脏细胞,构建ACSL1的过表达及干扰载体,瞬时转染到肝细胞,使用荧光显微镜观察转染情况。转染48小时后用Elisa方法定量分析细胞内甘油三酯含量,采用PCR array技术研究ACSL1基因影响脂代谢的机制。结果过表达ACSL1基因后,过表达组ACSL1的m RNA表达量明显高于阴性对照组,(17.49±5.10 vs 1.00±0.05,P=0.032);及过表达组ACSL1蛋白水平的表达量明显升高,细胞内甘油三酯含量明显上升(97.27±2.22 vs 72.35±0.44,P<0.001)。过表达ACSL1后与对照组相比显著下调了脂肪酸氧化... 

【文章来源】:吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】:45 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
中文摘要
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中英文缩略词对照表
第1章 引言
第2章 综述
    2.1 心肌梗死概念及流行病学特征
    2.2 心肌梗死与血脂异常
    2.3 心肌梗死基因诊断的进展
    2.4 血脂异常基因治疗的进展
第3章 材料与方法
    3.1 研究材料及器械
    3.2 研究方法
        3.2.1 载体的构建
        3.2.2 细胞培养
        3.2.3 细胞转染
        3.2.4 Western Blot检测ACSL1 基因在蛋白质水平的表达.
        3.2.5 ACSL1 基因的 mRNA 表达及采用 PCR array 技术检测脂代谢相关基因
        3.2.6 甘油三酯含量检测
    3.3 统计分析
第4章 结果
    4.1 ACSL1 基因过表达及干扰载体转染健康人肝细胞
    4.2 Western blot 分析
    4.3 过表达ACSL1 基因结果RT-qPCR分析
    4.4 过表达ACSL1 后甘油三脂含量测定结果
    4.5 过表达ACSL1 基因后PCR array结果分析
    4.6 干扰ACSL1 基因结果RT-qPCR分析
    4.7 干扰ACSL1 后甘油三脂含量测定结果
    4.8 干扰ACSL1 基因后PCR array结果分析
第5章 讨论
第6章 结论
参考文献
作者简介及在学期间所取得的科研成果
    作者简介
    在学期间取得的科研成果
致谢



本文编号:3200918

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