在心房颤动细胞模型中，ATBF1与PIAS3协同作用激活了STAT3信号通路

发布时间：2021-06-21 09:59

　　背景：心房颤动（简称房颤）是临床上最为常见的心律失常性疾病,其发病过程是呈逐步进展性的。房颤的发生和维持机制与炎症是相关的,而炎症反应又是以信号传导和转录激活因子3（signal transducer and activator of transcription3, STAT3）通路为特征的。在房颤病人的全基因组相关研究中,已经发现在锌指同源框3（zinc finger homeobox3, ZFHX3,也称为AT结构域结合因子1即AT-motif binding factor1, ATBF1）基因上存在基因多态性位点。但是,ATBF1在房颤中导致炎症产生的具体作用机制并不清楚。目的：本研究的目的是探讨在电刺激诱导的房颤细胞模型中,ATBF1水平的下调能与活化的STAT3蛋白抑制剂（protein inhibitor of activated STAT3, PIAS3）协同作用,最终激活STAT3信号通路。方法：通过对HL-1细胞（心房肌细胞系）的高频电刺激诱导构建房颤细胞模型。设计并合成针对ATBF1和PIAS3基因编码区的干扰序列,以及ATBF1的过表达质粒,在脂质体2000（Li... 

【文章来源】：南京医科大学江苏省

【文章页数】：73 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

电刺激能够诱导调亡效应分子Caspase-3的表达增加A图：WesternBlotting检测在电刺激24小时时细胞Caspase-3蛋白的表达变化；

+图4 ： ATBFl siRNA的转染能增强电刺激对STAT3信号通路的激活A图：ATBF1 siRNA或si-NC转染至HL-1细胞后，再电刺激24小时后通过Western Blotting 检测 ATBFl、PIAS3、p-STAT3 和 STAT3 的蛋白表达水平（以P-actin为内参）；B图：ATBF1蛋白水平在电刺激（尸<0.01)或转染ATBFls丨RNA(/^<0.01)时均明显下调；同时进行电刺激和转染ATBF1 siRNA时下调更为显著(P< 0.001);C图：PIAS3蛋白水平在电刺激（P < 0.05)或转染ATBF1 siRNA(/? < 0.05)时均明显降低；同时进行电刺激和转染ATBF1 siRNA时降低更为显著(尸< 0.01);D图：P-STAT3蛋白水平在电刺激（P<0

--图5 ： ATBFl的过表达能够抑制电刺激对STAT3信号通路的激活A图：pKXUal-HA-ATBFl质粒转染至HL-1细胞再加电刺激24小时后WesternBlotting 检测 ATBFl、PIAS3、p-STAT3 和总 STAT3 的蛋白表达水平（以 p-actin为内参）；B图：ATBF1蛋白水平在对HL-1细胞只进行电刺激时下调（P<0.01)，在只转染pKXUal-HA-ATBFl质粒时明显上调(P< 0.001)，而在同时进行电刺激和转染pKXUal-HA-ATBFl质粒后较只进行电刺激时显著下调(P< 0.01);C图：PIAS3蛋白水平在对HL-1细胞只进行电刺激时降低（P<0.01)，在只转染pKXUal-HA-ATBFl质粒时明显上调(/? < 0.05)，而在同时进行电刺激和转染pKXUal-HA-ATBFl质粒后较只进行电刺激时显著降低0.001);D图：P-STAT3蛋白水平在对HL-l细胞只进行电刺激时上调(P < 0.001)，在只转染pKXUal-HA-ATBFl质粒时明显下降(/^ < 0.01)，而在同时进行电刺激和转染pKXUal-HA-ATBFl质粒后较只进行电刺激时显著下降(/>< 0.001);E图：总STAT3蛋白水平在电刺激和(或）转染pKXUal-HA-ATBFl质粒时均无显著性差异（/^>0


本文编号：3240473