第一部分 铁剂难治性缺铁性贫血临床特征及TMPRSS6基因突变分析;第二部分 SON与iASPP相互作用对白血病细胞的影

发布时间：2021-06-22 04:19

　　目的：分析总结铁剂难治性缺铁性贫血（IRIDA）患者临床特征及其跨膜丝氨酸蛋白酶6（TMPRSS6）基因突变情况,提高对铁剂难治性缺铁性贫血（IRIDA）的认识。方法：采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测临床表现疑似IRIDA的患者外周血hepcidin水平,符合IRIDA诊断者纳入本次研究。总结其血液学特征；PCR扩增及测序方法检测分析其家系TMPRSS6基因突变情况；通过Swiss-Model及Alamut软件预测分析相应突变对TMPRSS6基因转录、翻译及蛋白空间结构的影响；实时荧光定量PCR（RQ-PCR）检钡TMPRSS6基因mRNA表达水平。结果：本次研究共纳入4个IRIDA家系中5例IRIDA患者。临床表现为轻中度小细胞低色素贫血,MCV、MCH极低、血清铁及转铁蛋白饱和度明显减低,血浆hepcidin明显高于获得性IDA患者,对补铁治疗尤其是口服补铁治疗缺乏网织红细胞和血红蛋白升高反应。TMPRSS6基因（参考序列NM153609.2）检测发现1例患者7号外显子c.757A>G（K253E）纯合子错义突变；计算机模拟分析预测该突变可导致TMPRSS6蛋白空间构象改... 

【文章来源】：北京协和医学院北京市 211工程院校 985工程院校

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【学位级别】：博士

【部分图文】：

TMPRSS6结构示意图

图2.TMPRSS6溶解曲线. PCR扩增TMPRSS6编码区c.lll3G>A两端cDNA1)引物设计针对c.in3G>A位点上下游设计引码序列为模板，在Primer5软件中设计包含c.l 1的PCR双向引物，后在NCBI的BLAST数据有同源序列（表3)。表 3. TMPRSS6 c.lll3G>A 上下游引物Primer sequences (F = forward, R = reverse)F: ATGGCGGTCGTCTGGAAGAAGGGR: GATCTGGGAGGTGAAGTTGATGGTGA

A.细胞内铁（+ ) B.?细胞外铁（++)图3.患者A骨髓涂片铁染色骨髓涂片铁染色（xlOO倍，普鲁士蓝反应）：A -细胞内铁幼红细胞内铁颗粒明显减少，颗粒细小，铁粒幼细胞较少见；B -细胞外铁骨髓小粒中可见较多呈蓝色小片状分布的铁颗粒，部分呈深蓝色粗颗粒状或块分布外周血血衆hepcidin检测结果显示，健康成人hepcidin水平为157.02(15.18-357.28)ng/ml； 8例经补铁治疗有效的IDA患者补铁治疗前外周血hepcidin水平 5.19 (3.31-12.02) ng/ml; A 患者就诊时 hepcidin 水平血楽 213. H ng/ml,与获得性缺铁性贫血患者相比明显升高。TMPRSS6基因检测显示患者TMPRSS6基因7号外显子存在纯合子c.757A>G(K253E)突变，导致TMPRSS6蛋白第253位赖氨酸被谷氨酸替代，发生K253E错义突变（图4)，其父母均为该位点杂合子突变。通过Swiss-Model分析发现TMPRSS6蛋白第253位氨基酸由赖氨酸突变为谷氨酸后，三维结构模型显示，突变后TMPRSS6蛋白丝氨酸蛋白酶活性区、SEA、


本文编号：3242105