微小RNA-423-5p靶向乙醛脱氢酶2减轻脂多糖诱导的人脐静脉血管内皮细胞损伤

发布时间：2021-06-23 00:45

　　目的探讨微小RNA-423-5p（miR-423-5p）对脂多糖（LPS）诱导血管内皮细胞损伤的保护及作用机制。方法用1 mg/L LPS诱导人脐静脉血管内皮细胞（HUVECs） 24 h,Real-time PCR和Western blotting检测细胞中miR-423-5p和乙醛脱氢酶2（ALDH2）的表达。通过转染anti-miR-423-5p和pc DNA-ALDH2下调miR-423-5p和上调ALDH2表达,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blotting检测凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达,并用ELISA试剂盒检测LPS诱导后细胞上清液中白细胞介素6（IL-6）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）的含量;双荧光素酶报告系统验证miR-423-5p与ALDH2的调控关系。结果与对照相比,LPS可诱导HUVECs凋亡和损伤,使HUVECs中miR-423-5p、Bax表达量及IL-6和TNF-α分泌量均显著升高（P <0. 05）,ALDH2的mRNA和蛋白表达量及Bcl-2量显著降低（P <0. 05）;下调miR-423-5p表达和过表达ALDH2均... 

【文章来源】：解剖学报. 2020,51(06)北大核心CSCD

【文章页数】：9 页

【部分图文】：

LPS处理对HUVECs形态的影响(荧光染色)

LPS处理对HUVECs中miR-423-5p表达的影响

ALDH2的3’UTR中含有与miR-423-5p互补的序列，见图11。双荧光素酶报告系统结果如图12所示，过表达miR-423-5p可使WT-ALDH2的萤火虫荧光素酶相对活性显著降低(P<0.05);而MUT-ALDH2的荧光素酶相对活性无明显变化。Western blotting实验结果显示，过表达miR-423-5p可下调ALDH2表达量(P<0.05);抑制miR-423-5p表达则上调ALDH2表达量(P<0.05)，见图13。说明miR-423-5p靶向负调控ALDH2的表达。6．抑制ALDH2表达逆转了下调miR-423-5p表达对LPS诱导的HUVECs损伤的作用


本文编号：3243873