RanBPM对肾小管钠-氯共同转运子的调控作用及对ERK1/2信号通路的影响

发布时间：2021-07-03 23:34

　　目的:观察Ran结合蛋白M（RanBPM）对肾小管钠-氯共同转运子（NCC）蛋白表达及相关ERK1/2信号通路蛋白表达的影响。方法:免疫共沉淀检测RanBPM蛋白与WNK4蛋白是否存在直接相互作用;观察转染RanBPM质粒对EGF诱导细胞ERK1/2磷酸化的影响,通过转染质粒过表达RanBPM蛋白或siRNA抑制RanBPM基因,免疫蛋白印迹法检测细胞内源性NCC蛋白含量和ERK1/2磷酸化水平的变化。结果:免疫共沉淀实验证实WNK4和RanBPM之间存在直接的相互作用。RanBPM可以抑制EGF诱导的ERK1/2磷酸化。RanBPM过表达可使细胞ERK1/2磷酸化减少（1.000±0.074 vs. 0.275±0.041,P<0.01）,而NCC蛋白表达增加（1.000±0.115 vs.1.470±0.105,P<0.01）。siRNA沉默RanBPM基因后,ERK1/2磷酸化增加（1.000±0.194 vs. 2.301±0.220,P<0.01）,NCC蛋白表达下降（1.000±0.223 vs. 0.556±0.132,P<0.01）。转染RanB... 

【文章来源】：温州医科大学学报. 2020,50(07)

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【部分图文】：

WNK4与RanBPM之间存在蛋白相互作用

结果显示，0.3 ng/mL EGF处理HEK 293T细胞15 min后，ERK1/2磷酸化水平明显增加，然而，在HEK 293T细胞转染RanBPM的情况下，ERK1/2磷酸化水平呈现减少现象，证实RanBPM是ERK1/2磷酸化信号传导通路的抑制剂。见图2。2.3 RanBPM过表达对NCC蛋白含量和ERK1/2磷酸化水平的影响


本文编号：3263572