细粒棘球蚴囊液体外保护脂多糖诱导大鼠心肌细胞H9C2损伤的效果评价及机制研究

发布时间：2021-07-09 01:28

　　背景和目的:心肌炎是指由感染或非感染性因素引起的心脏病理免疫过程的临床和组织学表现,通常会继发其他心血管疾病,如急性心力衰竭和慢性扩张型心肌病等。心肌炎的临床表现复杂多样,且病程的轻重缓急悬殊,临床上对心肌炎的治疗方法有一定局限性,如非甾体类抗炎药在小鼠柯萨奇B3病毒性心肌炎中被证明有毒害作用,现有的诊治方法只能降低住院率,但是病死率并没有明显下降。因此对新型抗心肌炎药物的研究应运而生。细粒棘球蚴囊液作为包虫感染宿主后在宿主内形成的包囊的主要成分,可以调节宿主免疫应答,使包虫长期寄生在宿主体内但无明显症状。细粒棘球蚴囊液可以通过调节宿主免疫系统抑制宿主炎症反应。本实验研究细粒棘球蚴囊液对LPS引起的大鼠心肌细胞H9C2炎性损伤的保护作用,并探讨其发生的可能机制,为心肌炎的治疗提供新的方法和思路。方法:体外培养大鼠心肌细胞H9C2,使用LPS（终浓度为10μg/ml）建立心肌炎损伤模型,不同浓度细粒棘球蚴囊液（200μg/ml、100μg/ml、50μg/ml、25μg/ml）作用于该模型后,用相差显微镜观察各组H9C2细胞形态;使用MTT实验检测各组H9C2细胞生存率。200μg/ml... 

【文章来源】：兰州大学甘肃省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：59 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

细粒棘球蚴包囊结构

兰州大学硕士学位论文细粒棘球蚴囊液体外保护脂多糖诱导大鼠心肌细胞H9C2损伤的效果评价及机制研究17y=0.6713x-0.0007,R2=0.9993。依据标准曲线方程，计算得到细粒棘球蚴囊液样品浓度为0.73mg/ml(图2-1)。用12.5%SDS-PAGE电泳对细粒棘球蚴囊液进行蛋白定性鉴定，蛋白凝胶成像结果显示，70kDa指示的条带为牛宿主蛋白，38kDa指示的条带为目标蛋白即细粒棘球蚴囊液主要抗原成分(图2-1)。图2-1细粒棘球蚴囊液蛋白浓度标准曲线与主要蛋白条带Figure2-1TheproteinconcentrationstandardcurveofandmainproteinbandsofE.granulosuscystfluid2.9.2细粒棘球蚴囊液体外对H9C2细胞和HUVEC细胞生长的影响体外培养H9C2细胞和HUVEC细胞，设置不同浓度细粒棘球蚴囊液代替胎牛血清培养细胞以及使用胎牛血清常规培养细胞的对照组，培养48h。使用MTT实验检测各组细胞生存率，发现与FBS组相比，不同浓度细粒棘球蚴囊液培养组的H9C2细胞和HUVEC细胞的生存率无统计学差异(图2-2)。其中，CF200μg/ml组的H9C2细胞生存率(105.12%±12.87%)略高于FBS培养组(98.37%±5.56%)(图2-2A)。图2-2细粒棘球蚴囊液对H9C2细胞、HUVEC细胞生长的影响(n.s代表没有统计学差异)Figure2-2TheeffectsofE.granulosuscystfluidonsurvivalofH9C2andHUVEC(n.smeansnosignificance)

兰州大学硕士学位论文细粒棘球蚴囊液体外保护脂多糖诱导大鼠心肌细胞H9C2损伤的效果评价及机制研究17y=0.6713x-0.0007,R2=0.9993。依据标准曲线方程，计算得到细粒棘球蚴囊液样品浓度为0.73mg/ml(图2-1)。用12.5%SDS-PAGE电泳对细粒棘球蚴囊液进行蛋白定性鉴定，蛋白凝胶成像结果显示，70kDa指示的条带为牛宿主蛋白，38kDa指示的条带为目标蛋白即细粒棘球蚴囊液主要抗原成分(图2-1)。图2-1细粒棘球蚴囊液蛋白浓度标准曲线与主要蛋白条带Figure2-1TheproteinconcentrationstandardcurveofandmainproteinbandsofE.granulosuscystfluid2.9.2细粒棘球蚴囊液体外对H9C2细胞和HUVEC细胞生长的影响体外培养H9C2细胞和HUVEC细胞，设置不同浓度细粒棘球蚴囊液代替胎牛血清培养细胞以及使用胎牛血清常规培养细胞的对照组，培养48h。使用MTT实验检测各组细胞生存率，发现与FBS组相比，不同浓度细粒棘球蚴囊液培养组的H9C2细胞和HUVEC细胞的生存率无统计学差异(图2-2)。其中，CF200μg/ml组的H9C2细胞生存率(105.12%±12.87%)略高于FBS培养组(98.37%±5.56%)(图2-2A)。图2-2细粒棘球蚴囊液对H9C2细胞、HUVEC细胞生长的影响(n.s代表没有统计学差异)Figure2-2TheeffectsofE.granulosuscystfluidonsurvivalofH9C2andHUVEC(n.smeansnosignificance)


本文编号：3272731