DNMT1沉默对LncRNA GAS5通过NLRP3调控心肌成纤维细胞焦亡影响的机制研究

发布时间：2021-07-23 14:43

　　目的心肌成纤维细胞是心脏发生纤维化的主要效应细胞,影响心肌成纤维细胞的生长可以有效地抑制心肌纤维化的发生发展。通过本课题组前期研究,我们确定了长链非编码RNA中的LncRNA GAS5对心肌成纤维细胞的焦亡以及心脏纤维化起到重要的作用。进一步的研究表明,DNMT1的下调通过逆转心脏成纤维细胞中的启动子高甲基化而导致GAS5表达增加。本实验我们旨在通过研究LncRNA GAS5对心肌成纤维细胞焦亡调控的机制,为心脏纤维化提供了新的治疗目标。方法取SD大鼠40只,随机分为实验组与对照组,各20只。实验组大鼠皮下注射ISO,对照组大鼠皮下注射生理盐水,连续两周。HE和Masson,Sirius染色观察大鼠心脏组织的病理学改变。Western blot以及qRT-PCR分析组织中caspase1,NLRP3,DNMT1和Col11的表达。提取SD乳鼠的心肌成纤维细胞,瞬时转染LncRNA GAS5的过表达质粒（pc DNA3.1-GAS5）及其阴性对照,LncRNA GAS5的si RNA（si GAS5）及其阴性对照,24小时后收集细胞,用qRT-PCR检测GAS5,DNMT1,一型胶原（C... 

【文章来源】：安徽医科大学安徽省

【文章页数】：58 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

HE染色后，ISO处理后的实验组心脏样本与对照组心脏样本的病理学变化

安徽医科大学硕士学位论文252（n=3，P<0.05，差异具有统计学意义）。N对照组200×ISO模型组200×图2:Masson染色后，ISO处理后的实验组心脏样本与正常组心脏样本的病理学变化Fig.2MassonstainingofSDRat"smyocardialtissueSiriusred染色结果:胶原纤维经天狼星红染液染色后会呈现为黄色或红色。与正常组N组进行比较，ISO组中胶原排列无序且增多，甚至充满部分区域，相比之下，正常组排列明显整齐，形态较为一致，如Fig.3（n=3，P<0.05，差异具有统计学意义）。N对照组200×ISO模型组200×

安徽医科大学硕士学位论文26图3:Siriusred染色后，IS0处理后的实验组心脏样本与正常组心脏标本的病理学变化Fig.3MassonstainingofSDRat"smyocardialtissue免疫组化，Westernblot和QRT-PCR结果均表明，经ISO处理后的大鼠心脏组织中，Caspase1，NLRP3的表达明显升高，结果如Fig.4，Fig.5和Fig.6。（n=3，P<0.05，差异具有统计学意义）。N对照组200×ISO模型组200×


本文编号：3299486