circ-sirt1抑制THP-1单核细胞NF-κB激活和炎症应答
发布时间:2021-07-24 19:26
目的:单核细胞浸润和活化引发的血管壁持续性炎症反应是心血管疾病发病机制之一。SIRT1是一种维持血管稳态的重要表观遗传学调控因子,但是,其前体mRNA可变剪接产物的功能尚不清楚。本研究以SIRT1基因外显子2-7共价闭合环化形成的环状非编码RNA circ-sirt1为研究对象,从细胞和分子水平来探讨circ-sirt1在人单核细胞株(THP-1)炎症应答中的作用。方法:体外培养人单核细胞株THP-1,采用circ-sirt1重组腺病毒表达载体(Ad-circ-sirt1),运用荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot方法检测单核细胞中IL-1β、IL-6和MCP-1的表达以及p65蛋白的表达变化;利用RIP和RNA pull-down分析证实circ-sirt1和p65蛋白之间的相互作用关系。结果:1.为了确定circ-sirt1在单核细胞中的表达,跨越环化位点设计引物,以总RNA为模板进行RT-PCR,对PCR产物进行测序,证实circ-sirt1在单核细胞中的表达。2.分别给予佛波酯(PMA)和TNF-α处理单核细胞,qRT-PCR结果显示,PMA和TNF-α可...
【文章来源】:河北医科大学河北省
【文章页数】:49 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
circ-sirt1在THP-1单核细胞中的表达
17刺激抑制 THP-1 单核细胞 circimulation inhibited of circ-sirt1was performed to detect cicells. B: qRT-PCR was performreated THP-1 cells. Data are sumed with TNF-α untreated group.rt1 抑制炎症因子表达达 circ-sirt1 对单核细胞炎毒转染单核细胞后,给予 TNF
18图 3 过表达 circ-sirt1 抑制炎症因子表达Fig.3 Overexpression of circ-sirt1 inhibits the expression of inflammatoryfactors. A: The expression of circ-sirt1 increased in Ad-circ-sirt1-infectedTHP-1 cells. B. qRT-PCR was performed to detect IL-1β, IL-6 and MCP-1mRNA expression in Ad-circ-sirt1-infected THP-1 cells treated with TNF-α.Data are summarized as mean±SD, n=3. *P<0.05, compared withAd-Vector+TNF-α group.4. circ-sirt1 抑制 NF-κB p65 核转位以往研究表明,NF-κB 是体内炎症反应中重要转录调控因子,体外实
本文编号:3301281
【文章来源】:河北医科大学河北省
【文章页数】:49 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
circ-sirt1在THP-1单核细胞中的表达
17刺激抑制 THP-1 单核细胞 circimulation inhibited of circ-sirt1was performed to detect cicells. B: qRT-PCR was performreated THP-1 cells. Data are sumed with TNF-α untreated group.rt1 抑制炎症因子表达达 circ-sirt1 对单核细胞炎毒转染单核细胞后,给予 TNF
18图 3 过表达 circ-sirt1 抑制炎症因子表达Fig.3 Overexpression of circ-sirt1 inhibits the expression of inflammatoryfactors. A: The expression of circ-sirt1 increased in Ad-circ-sirt1-infectedTHP-1 cells. B. qRT-PCR was performed to detect IL-1β, IL-6 and MCP-1mRNA expression in Ad-circ-sirt1-infected THP-1 cells treated with TNF-α.Data are summarized as mean±SD, n=3. *P<0.05, compared withAd-Vector+TNF-α group.4. circ-sirt1 抑制 NF-κB p65 核转位以往研究表明,NF-κB 是体内炎症反应中重要转录调控因子,体外实
本文编号:3301281
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