HOXA-AS2靶向miR-17对人脐静脉内皮细胞生物学功能以及炎症因子的影响
发布时间：2021-08-03 10:01
目的探讨HOXA-AS2对动脉粥样硬化 （AS）模型细胞生物学功能以及炎症因子的影响及分子机制。方法本实验共分为4个实验;实验1:用100 μg/mL的ox-LDL处理EA.hy926细胞作为ox-LDL组,正常培养的细胞作为对照组;实验2:将pcDNA3.1、pcDNA3.1-HOXA-AS2转染至EA.hy926细胞中再用100 μg/mL的ox-LDL处理,记为ox-LDL+pcDNA3.1组、ox-LDL+pcDNA3.1-HOXA-AS2组;实验3:将pcDNA3.1、pcDNA3.1-HOXA-AS2、si-NC、si-HOXA-AS2分别转染至EA.hy926细胞中,记为pcDNA3.1组、pcDNA3.1-HOXA-AS2组、si-NC组、si-HOXA-AS2组;实验4:将pcDNA3.1-HOXA-AS2与miR-NC、miR-17分别共转染至EA.hy926细胞中再用100 μg/mL的ox-LDL处理,记为ox-LDL+pcDNA3.1-HOXA-AS2+miR-NC组、ox-LDL+pcDNA3.1-HOXA-AS2+miR-17组。实时荧光定量PCR （RT...
【文章来源】：中华细胞与干细胞杂志(电子版). 2020,10(03)
【文章页数】：8 页
【部分图文】：
对照组与ox-LDL组细胞相关指标的差异
表2 HOXA-AS2的表达及ox-LDL处理对EA.hy926细胞增殖率、凋亡率及P21、cleaved caspase 3蛋白表达的影响（,n=3) 分组 HOXA-AS2 P21 cleaved caspase 3 caspase 3 增殖率(﹪) 凋亡率(﹪) 对照组 1.02±0.10 0.20±0.02 0.14±0.01 0.26±0.03 100.06±10.20 8.23±0.80 ox-LDL组 0.23±0.02 0.82±0.08 0.67±0.06 0.89±0.08 47.83± 5.01 26.81±2.47 t 值 13.417 13.023 15.092 12.771 7.961 12.395 P 值 ＜ 0.001 ＜ 0.001 ＜ 0.001 ＜ 0.001 0.001 ＜ 0.001注:n为实验重复次数表3 过表达HOXA-AS2对ox-LDL处理的EA.hy926细胞增殖率、凋亡率及P21、cleaved caspase 3、caspase3蛋白表达的影响（,n=3) 分组 HOXA-AS2 P21 cleaved caspase 3 caspase 3 增殖率(﹪) 凋亡率(﹪) ox-LDL+pcDNA3.1组 0.22±0.02 0.81±0.08 0.69±0.06 0.88±0.08 48.21±4.86 26.83±2.48 ox-LDL+pcDNA3.1-HOXA-AS2组 0.87±0.09 0.33±0.03 0.24±0.02 0.42±0.04 89.94±8.34 12.33±1.18 t 值 12.211 9.731 12.324 8.908 7.488 9.145 P值 ＜ 0.001 0.001 ＜ 0.001 0.001 0.002 0.001注:n为实验重复次数
表5 双荧光素酶报告实验对HOXA-AS2和miR-17靶向关系的验证(,n=3) 分组 WT-HOXA-AS2 MUT-HOXA-AS2 miR-NC组 1.01±0.10 0.94±0.09 miR-17组 0.33±0.03a 1.02±0.10 anti-miR-NC组 1.00±0.10 1.01±0.10 anti-miR-17组 2.29±0.21b 0.99±0.10 F值 123.931 0.399 P值 ＜ 0.001 0.758注:与miR-NC组比较,aP < 0.05;与anti-miR-NC组比较,bP < 0.05;n为实验重复次数表6 过表达mi R-17能逆转HOXA-AS2对ox-LDL作用的EA.hy926细胞中IL-1和IL-6表达及细胞增殖率的影响（,n=3) 分组 细胞增殖率 (﹪) IL-1 (ng/L) IL-6 (ng/L) ox-LDL+pcDNA3.1-HOXA-AS2组 90.23±9.24 452.01±42.96 26.14±2.42 ox-LDL+pcDNA3.1-HOXA-AS2+miR-NC组 90.21±9.16 451.21±43.58 26.11±2.39 ox-LDL+pcDNA3.1- HOXA-AS2+miR-17组 53.67±5.46ab 684.26±62.38ab 41.29±4.37ab F值 20.130 21.265 22.499 P值 0.002 0.002 0.002注:与ox-LDL+pcDNA3.1-HOXA-AS2组比较,aP < 0.05;与ox-LDL+pcDNA3.1-HOXA-AS2+miR-NC组比较,bP < 0.05;n为实验重复次数
【参考文献】：
期刊论文
[1]长链非编码RNA与颈动脉粥样硬化关系的研究进展[J]. 陈红芳,程兴,王建伟,邵慧军,潘小玲. 浙江医学. 2019(07)
[2]microRNA在动脉粥样硬化中的研究进展[J]. 韩杨,蒋知新. 临床和实验医学杂志. 2019(04)
[3]lncRNA在动脉粥样硬化中的研究进展[J]. 张睿,蔡君艳. 医学综述. 2019(02)
[4]miR-17与冠心病患者冠状动脉病变程度、侧支循环形成及血清Ox-LDL、25（OH）D3的关系[J]. 范迎春,卓著,李潇,赵立飞,卢静海. 实用医学杂志. 2018(23)
[5]动脉粥样硬化诊断技术研究进展[J]. 黄芝. 影像研究与医学应用. 2018(13)
[6]miR-17-5p在动脉粥样硬化小鼠中的作用机制研究[J]. 谭力力,刘丽敏. 安徽医科大学学报. 2018(06)
[7]miR-17在动脉粥样硬化中下调ATG7蛋白水平抑制巨噬细胞的自噬功能[J]. 林庚海,阮发晖,陈劲松,庄金龙,范伟伟. 医学研究杂志. 2018(01)
[8]重视动脉粥样硬化相关发病机制的研究[J]. 王深明,吴伟滨. 中华血管外科杂志. 2017(4)
[9]动脉粥样硬化机制研究进展[J]. 王阳,米树华,杨关林. 中国医药. 2017 (04)
[10]动脉粥样硬化与内皮细胞损伤机制的研究进展[J]. 林艾雯,陈竹君. 岭南心血管病杂志. 2015(04)
硕士论文
[1]α-硫辛酸对氧化低密度脂蛋白导致的人脐静脉内皮细胞损伤的保护作用的研究[D]. 刘艳霞.大连医科大学 2010
本文编号：3319421
【文章来源】：中华细胞与干细胞杂志(电子版). 2020,10(03)
【文章页数】：8 页
【部分图文】：
对照组与ox-LDL组细胞相关指标的差异
表2 HOXA-AS2的表达及ox-LDL处理对EA.hy926细胞增殖率、凋亡率及P21、cleaved caspase 3蛋白表达的影响（,n=3) 分组 HOXA-AS2 P21 cleaved caspase 3 caspase 3 增殖率(﹪) 凋亡率(﹪) 对照组 1.02±0.10 0.20±0.02 0.14±0.01 0.26±0.03 100.06±10.20 8.23±0.80 ox-LDL组 0.23±0.02 0.82±0.08 0.67±0.06 0.89±0.08 47.83± 5.01 26.81±2.47 t 值 13.417 13.023 15.092 12.771 7.961 12.395 P 值 ＜ 0.001 ＜ 0.001 ＜ 0.001 ＜ 0.001 0.001 ＜ 0.001注:n为实验重复次数表3 过表达HOXA-AS2对ox-LDL处理的EA.hy926细胞增殖率、凋亡率及P21、cleaved caspase 3、caspase3蛋白表达的影响（,n=3) 分组 HOXA-AS2 P21 cleaved caspase 3 caspase 3 增殖率(﹪) 凋亡率(﹪) ox-LDL+pcDNA3.1组 0.22±0.02 0.81±0.08 0.69±0.06 0.88±0.08 48.21±4.86 26.83±2.48 ox-LDL+pcDNA3.1-HOXA-AS2组 0.87±0.09 0.33±0.03 0.24±0.02 0.42±0.04 89.94±8.34 12.33±1.18 t 值 12.211 9.731 12.324 8.908 7.488 9.145 P值 ＜ 0.001 0.001 ＜ 0.001 0.001 0.002 0.001注:n为实验重复次数
表5 双荧光素酶报告实验对HOXA-AS2和miR-17靶向关系的验证(,n=3) 分组 WT-HOXA-AS2 MUT-HOXA-AS2 miR-NC组 1.01±0.10 0.94±0.09 miR-17组 0.33±0.03a 1.02±0.10 anti-miR-NC组 1.00±0.10 1.01±0.10 anti-miR-17组 2.29±0.21b 0.99±0.10 F值 123.931 0.399 P值 ＜ 0.001 0.758注:与miR-NC组比较,aP < 0.05;与anti-miR-NC组比较,bP < 0.05;n为实验重复次数表6 过表达mi R-17能逆转HOXA-AS2对ox-LDL作用的EA.hy926细胞中IL-1和IL-6表达及细胞增殖率的影响（,n=3) 分组 细胞增殖率 (﹪) IL-1 (ng/L) IL-6 (ng/L) ox-LDL+pcDNA3.1-HOXA-AS2组 90.23±9.24 452.01±42.96 26.14±2.42 ox-LDL+pcDNA3.1-HOXA-AS2+miR-NC组 90.21±9.16 451.21±43.58 26.11±2.39 ox-LDL+pcDNA3.1- HOXA-AS2+miR-17组 53.67±5.46ab 684.26±62.38ab 41.29±4.37ab F值 20.130 21.265 22.499 P值 0.002 0.002 0.002注:与ox-LDL+pcDNA3.1-HOXA-AS2组比较,aP < 0.05;与ox-LDL+pcDNA3.1-HOXA-AS2+miR-NC组比较,bP < 0.05;n为实验重复次数
【参考文献】：
期刊论文
[1]长链非编码RNA与颈动脉粥样硬化关系的研究进展[J]. 陈红芳,程兴,王建伟,邵慧军,潘小玲. 浙江医学. 2019(07)
[2]microRNA在动脉粥样硬化中的研究进展[J]. 韩杨,蒋知新. 临床和实验医学杂志. 2019(04)
[3]lncRNA在动脉粥样硬化中的研究进展[J]. 张睿,蔡君艳. 医学综述. 2019(02)
[4]miR-17与冠心病患者冠状动脉病变程度、侧支循环形成及血清Ox-LDL、25（OH）D3的关系[J]. 范迎春,卓著,李潇,赵立飞,卢静海. 实用医学杂志. 2018(23)
[5]动脉粥样硬化诊断技术研究进展[J]. 黄芝. 影像研究与医学应用. 2018(13)
[6]miR-17-5p在动脉粥样硬化小鼠中的作用机制研究[J]. 谭力力,刘丽敏. 安徽医科大学学报. 2018(06)
[7]miR-17在动脉粥样硬化中下调ATG7蛋白水平抑制巨噬细胞的自噬功能[J]. 林庚海,阮发晖,陈劲松,庄金龙,范伟伟. 医学研究杂志. 2018(01)
[8]重视动脉粥样硬化相关发病机制的研究[J]. 王深明,吴伟滨. 中华血管外科杂志. 2017(4)
[9]动脉粥样硬化机制研究进展[J]. 王阳,米树华,杨关林. 中国医药. 2017 (04)
[10]动脉粥样硬化与内皮细胞损伤机制的研究进展[J]. 林艾雯,陈竹君. 岭南心血管病杂志. 2015(04)
硕士论文
[1]α-硫辛酸对氧化低密度脂蛋白导致的人脐静脉内皮细胞损伤的保护作用的研究[D]. 刘艳霞.大连医科大学 2010
本文编号：3319421
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