叶酸通过下调ERK1/2信号通路抑制血管平滑肌细胞增殖和迁移
发布时间：2021-09-01 14:09
目的:探讨叶酸（folic acid,FA）对血管平滑肌细胞（VSMCs）增殖和迁移的影响及其机制。方法:取SD大鼠的主动脉,采用组织贴块法培养VSMCs,随机分组进行实验。采用CCK-8和Ed U法检测叶酸对VSMCs活力和增殖能力的影响。采用划痕实验和Transwell法检测叶酸对VSMCs迁移和侵袭的影响。采用Western blot法检测细胞增殖核抗原（PCNA）蛋白表达以及血小板源性生长因子受体（PDGFR）和细胞外信号调节激酶1/2（ERK1/2）蛋白的磷酸化水平。结果:叶酸抑制血小板源性生长因子（PDGF）诱导的VSMCs的活力,并呈浓度依赖性（P<0.05）。叶酸抑制PDGF诱导的VSMCs的迁移,并呈浓度依赖性（P<0.05）。叶酸降低PCNA表达和PDGFR磷酸化水平,并抑制PDGF激活的ERK1/2信号通路。结论:叶酸降低PDGF诱导的VSMCs PCNA和p-PDGFR蛋白水平,下调ERK1/2信号通路,从而抑制VSMCs的增殖和迁移。
【文章来源】：中国病理生理杂志. 2017,33(03)北大核心CSCD
【文章页数】：6 页
【部分图文】：
各组VSMCs的细胞增殖能力2叶酸抑制PDGF诱导的VSMCs迁移3叶酸抑制PDGF激活的ERK1/2信号通路
Figure2．TheeffectoffolicacidontheproteinexpressionofPCNAintheVSMCswasdetectedbyWesternblot．Mean±SD．n=3．*P＜0.05vscontrolgroup;#P＜0.05vsPDGFgroup．图2各组VSMCs增殖标志蛋白PCNA的表达水平4叶酸通过下调ERK1/2抑制PDGF诱导的VSMCs活力和增殖迁移能力为了证实ERK1/2信号通路参与PDGF诱导VSMCs活力和增殖迁移能力，本研究加入ERK1/2通路抑制剂PD98059［8］，验证PD98059对PDGF诱导VSMCs活力和增殖迁移能力的作用，结果如图5显示。PD98059抑制PDGF诱导的VSMCs活力和增殖迁移能力(P＜0.05)。讨论本研究结果显示PDGF能促进VSMCs活力、增殖迁移能力和PCNA蛋白的表达，并发现叶酸能抑制PDGF诱导的VSMCs活力、增殖迁移能力和PCNA、PDGFR蛋白的表达，并进一步提示具有量效关系，PDGF激活ERK1/2信号通路，而叶酸抑制PDGF-BB激活的ERK1/2信号通路。ERK1/2信号通路抑制剂PD98059同样抑制PDGF-BB诱导的VSMCs活力、增殖迁移能力和PCNA、PDGFR蛋白的表达。这些结果表明叶酸的这种效应是通过下调ERK1/2信号通路实现的。Figure3．Theeffectsoffolicacidonthemigration(A)andinvasion(B)oftheVSMCswereexaminedbywoundhealingassayandTranswellassay(×100)．Mean±SD．n=3．*P＜0.05vscontrolgroup;#P＜0.05vsPDGFgroup．图3各组VSMCs迁移和侵袭能力·408·
Figure4．TheeffectsoffolicacidonthephosphorylationofPDGFRandERK1/2intheVSMCsweredetectedbyWesternblot．Mean±SD．n=3．*P＜0.05vscontrolgroup;#P＜0.05vsPDGFgroup．图4各组VSMCsPDGFR和ERK1/2磷酸化水平的变化Figure5．TheeffectoffolicacidonERK1/2signalingpathwayverifiedbyERK1/2inhibitorPD98059wasdetermined．A:theviabili-tyoftheVSMCswasmeasuredbyCCK-8assay;B:theproliferationabilityoftheVSMCswasexaminedbyEdUcellproli-ferationassay(×100);C:themigrationabilityoftheVSMCswasexaminedbywoundhealingassay(×100);D:thein-vasionabilityoftheVSMCswasexaminedbytranswellassay(×100);E:theproteinlevelsofPCNA，p-PDGFRandp-ERK1/2weredeterminedbyWesternblot．Mean±SD．n=3．*P＜0.05vscontrolgroup;#P＜0.05vsPDGFgroup．图5PD98059抑制PDGF诱导VSMCs增殖和迁移能力叶酸与其活性代谢物质5-甲基四氢叶酸是人类必需的营养物质，在核苷酸的合成和甲基化反应中扮演重要角色［9］。流行病学研究表明补充叶酸能降低心血管疾病不良事件的发生风险［10］。外源性补充叶酸可抑制氧化应激，改善血管内皮功能，延缓动脉粥样硬化的进展，有助于冠心病的防治。高剂量叶酸预处理改善缺血心肌功能，并减轻缺血再灌注损伤［11］。Cheng等［12］报道叶酸通过抑制ERK1/2/NOX4/ROS信号通路减轻由低氧所致的血管内皮细胞损伤。何志勇等［13］报道叶酸通过减少内皮细胞表·409·
【参考文献】：
期刊论文
[1]大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞原代培养方法的改进[J]. 孟立平,蒋承建,赵飞,郭艳,池菊芳,郭航远. 温州医科大学学报. 2015(08)
[2]活性氧和ERK1/2信号通路在缺氧大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖和凋亡中的作用[J]. 汤娜娜,刘先胜,徐永健,倪望,陈士新. 中国病理生理杂志. 2009(01)
[3]叶酸拮抗同型半胱氨酸诱导的内皮细胞凋亡的作用机制[J]. 何志勇,张雄,王小同. 中国病理生理杂志. 2007(04)
本文编号：3377119
【文章来源】：中国病理生理杂志. 2017,33(03)北大核心CSCD
【文章页数】：6 页
【部分图文】：
各组VSMCs的细胞增殖能力2叶酸抑制PDGF诱导的VSMCs迁移3叶酸抑制PDGF激活的ERK1/2信号通路
Figure2．TheeffectoffolicacidontheproteinexpressionofPCNAintheVSMCswasdetectedbyWesternblot．Mean±SD．n=3．*P＜0.05vscontrolgroup;#P＜0.05vsPDGFgroup．图2各组VSMCs增殖标志蛋白PCNA的表达水平4叶酸通过下调ERK1/2抑制PDGF诱导的VSMCs活力和增殖迁移能力为了证实ERK1/2信号通路参与PDGF诱导VSMCs活力和增殖迁移能力，本研究加入ERK1/2通路抑制剂PD98059［8］，验证PD98059对PDGF诱导VSMCs活力和增殖迁移能力的作用，结果如图5显示。PD98059抑制PDGF诱导的VSMCs活力和增殖迁移能力(P＜0.05)。讨论本研究结果显示PDGF能促进VSMCs活力、增殖迁移能力和PCNA蛋白的表达，并发现叶酸能抑制PDGF诱导的VSMCs活力、增殖迁移能力和PCNA、PDGFR蛋白的表达，并进一步提示具有量效关系，PDGF激活ERK1/2信号通路，而叶酸抑制PDGF-BB激活的ERK1/2信号通路。ERK1/2信号通路抑制剂PD98059同样抑制PDGF-BB诱导的VSMCs活力、增殖迁移能力和PCNA、PDGFR蛋白的表达。这些结果表明叶酸的这种效应是通过下调ERK1/2信号通路实现的。Figure3．Theeffectsoffolicacidonthemigration(A)andinvasion(B)oftheVSMCswereexaminedbywoundhealingassayandTranswellassay(×100)．Mean±SD．n=3．*P＜0.05vscontrolgroup;#P＜0.05vsPDGFgroup．图3各组VSMCs迁移和侵袭能力·408·
Figure4．TheeffectsoffolicacidonthephosphorylationofPDGFRandERK1/2intheVSMCsweredetectedbyWesternblot．Mean±SD．n=3．*P＜0.05vscontrolgroup;#P＜0.05vsPDGFgroup．图4各组VSMCsPDGFR和ERK1/2磷酸化水平的变化Figure5．TheeffectoffolicacidonERK1/2signalingpathwayverifiedbyERK1/2inhibitorPD98059wasdetermined．A:theviabili-tyoftheVSMCswasmeasuredbyCCK-8assay;B:theproliferationabilityoftheVSMCswasexaminedbyEdUcellproli-ferationassay(×100);C:themigrationabilityoftheVSMCswasexaminedbywoundhealingassay(×100);D:thein-vasionabilityoftheVSMCswasexaminedbytranswellassay(×100);E:theproteinlevelsofPCNA，p-PDGFRandp-ERK1/2weredeterminedbyWesternblot．Mean±SD．n=3．*P＜0.05vscontrolgroup;#P＜0.05vsPDGFgroup．图5PD98059抑制PDGF诱导VSMCs增殖和迁移能力叶酸与其活性代谢物质5-甲基四氢叶酸是人类必需的营养物质，在核苷酸的合成和甲基化反应中扮演重要角色［9］。流行病学研究表明补充叶酸能降低心血管疾病不良事件的发生风险［10］。外源性补充叶酸可抑制氧化应激，改善血管内皮功能，延缓动脉粥样硬化的进展，有助于冠心病的防治。高剂量叶酸预处理改善缺血心肌功能，并减轻缺血再灌注损伤［11］。Cheng等［12］报道叶酸通过抑制ERK1/2/NOX4/ROS信号通路减轻由低氧所致的血管内皮细胞损伤。何志勇等［13］报道叶酸通过减少内皮细胞表·409·
【参考文献】：
期刊论文
[1]大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞原代培养方法的改进[J]. 孟立平,蒋承建,赵飞,郭艳,池菊芳,郭航远. 温州医科大学学报. 2015(08)
[2]活性氧和ERK1/2信号通路在缺氧大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖和凋亡中的作用[J]. 汤娜娜,刘先胜,徐永健,倪望,陈士新. 中国病理生理杂志. 2009(01)
[3]叶酸拮抗同型半胱氨酸诱导的内皮细胞凋亡的作用机制[J]. 何志勇,张雄,王小同. 中国病理生理杂志. 2007(04)
本文编号：3377119
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