TiO 2 和SiO 2 两种纳米颗粒致人脐静脉内皮细胞凋亡及机制

发布时间：2021-09-28 21:37

　　目的研究二氧化钛纳米颗粒（TiO2-NPs）和二氧化硅纳米颗粒（SiO2-NPs）对人脐静脉内皮细胞凋亡的影响及其机制，为评价其对人体心血管系统的潜在影响提供实验依据。方法以TiO2-NPs （10、30、50、100nm四个粒径）和SiO2-NPs （10、25、50、100nm四个粒径）为研究对象，浓度梯度为0.2、1、5、25μg/mL，不加纳米颗粒为对照组，作用于人脐静脉内皮（HUVECs）细胞。采用CCK-8法检测纳米颗粒对HUVECs细胞增殖的影响；Hoechest33258染色观察处理后的细胞核形态变化；流式细胞术检测细胞凋亡率；Western Blot检测凋亡相关基因蛋白表达情况。结果1.不同粒径不同浓度TiO2-NPs和SiO2-NPs作用HUVECs细胞后，对细胞增殖产生不同程度的抑制。同一粒径下，随颗粒浓度增加，细胞存活率明显降低；相同浓度条件下，TiO2-NPs随粒径增加，细胞存活率显著降低；SiO2-NPs随粒径减小，细胞存活率降低明显。2.纳米颗粒处理细胞后，再用Hoecst33258染色，可见细胞核着色加深，核碎裂，并出现典型的凋亡小体。3.流式细胞术结果... 

【文章来源】：南华大学湖南省

【文章页数】：59 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

正常HUVECs（倒置显微镜，×200）

1. 纳米颗粒对 HUVECs 细胞增殖的影响用不同浓度（0.2、1、5、25 μg/mL）、不同粒径的 TiO2-NPs 和 SiO2-NP理 HUVECs 细胞 24 h 后，CCK-8 法检测各组细胞存活率。结果如图 2 和图 3 所示，同一粒径的 TiO2-NPs 和 SiO2-NPs 染毒组细胞率随浓度增加而降低，与对照组相比，差异有统计学意义(P＜0.05)，并具有的浓度-效应关系；在同一浓度条件下（1、5、25 μg/mL），TiO2-NPs 组随粒径增加细胞存明显下降（图 2，P＜0.05）；SiO2-NPs 组在同一浓度条件下（0.2、1、5、25 μg/随粒径减小，存活率显著降低（图 3），且具有一定的粒径-效应关系。TiO2的粒径为 100 nm，浓度为 25 μg/mL 时，细胞存活率为 40.7%±3.2；SiO2-NP粒径为 10 nm，浓度为 25 μg/mL 时，细胞存活率为 28.6%±2.6，设定对照组率为 100%。

图 3. 不同浓度、不同粒径 SiO2-NPs 对 HUVECs 存活率影响。*浓度之间比较 P＜0.05 vs control，#粒径之间比较 P＜0.05 vs control. 细胞核形态学观察Hoechst 33258 是一种 DNA 染料，能穿过细胞膜，使得细胞核着色，在紫下呈现蓝色荧光。正常细胞核着色后呈淡蓝色，染色均匀，核膜完整，细胞状规则呈圆形；发生凋亡的细胞核被着色成深蓝色，致密浓染，或呈碎块状浓染，晚期有典型的凋亡小体出现。如图 4、5 所示，Con 组细胞核呈规则的圆形，着淡蓝色，其余各处理组细呈不均一浓染，并有核碎裂和凋亡小体出现，说明经纳米颗粒处理之后的细生凋亡。


本文编号：3412572