载脂蛋白J过表达对大鼠血管平滑肌细胞增殖及迁移的影响

发布时间：2021-09-29 15:46

　　目的本研究通过脂质体转染法将重组质粒p CMV3-C-Apo J、空质粒p CMV3-C--CV,分别转染大鼠血管平滑肌细胞,并检测载脂蛋白J（Apolipoprotein J,Apo J）在其中的表达,观察Apo J过表达对大鼠血管平滑肌细胞增殖及迁移的影响,研究Apo J与再狭窄的关系及其可能导致再狭窄的机制。方法体外培养大鼠血管平滑肌细胞（USMC）,利用脂质体转染法将重组质粒p CMV3-C-Apo J、空质粒p CMV3-C--CV分别转染USMC。设置Apo J组、Control组。质粒转染USMC 48小时后,在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达情况,利用RIPA细胞裂解液裂解细胞,收集细胞蛋白,利用蛋白免疫印迹法（Western Blot,WB）检测载脂蛋白J（Apo J）、载脂蛋白E受体2（apolipoprotein E receptor2,Apo ER2）、极低密度脂蛋白受体（very low density lipoprotein receptor,VLDLR）表达情况。利用Cell Counting Kit-8（CCK-8试剂盒）分别检测质粒p CMV3-C-A... 

【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校

【文章页数】：76 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

空质粒pCMV3-C-GFPSpark-CV限制酶切图谱

天津医科大学硕士学位论文 二、结果二、结果1. 利用脂质体法将质粒转入体外培养的大鼠血管平滑肌细胞利用脂质体法将质粒 pCMV3-C-ApoJ 和空质粒 pCMV3-C-CV 转染大鼠血管平滑肌细胞(USMC)48 小时后，于倒置荧光显微镜下观察，绿色荧光在两组较多的大鼠血管平滑肌细胞中均能看到。发现绿色荧光主要在生长情况较好、处于分裂状态、折光性强的细胞中可观察到，并且明暗不均的绿色荧光提示外源性基因转入细胞后的拷贝数存在一定的差异。

载脂蛋白J的表达情况

【参考文献】：
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本文编号：3413986