RAGE在间歇缺氧致动脉粥样硬化作用中的体外研究

发布时间：2021-10-05 01:06

　　背景和目的:阻塞性呼吸睡眠暂停低通气综合征（OSAHS）的主要临床特征是睡眠状态下的间歇缺氧（IH）,也是导致包括动脉粥样硬化在内的很多心血管疾病的独立危险因素。在临床观察中发现OSAHS病人外周血单核细胞RAGE含量明显高于正常人,持续正压通气治疗能减少病人外周血单核细胞RAGE表达。OSAHS致动脉粥样硬化的具体发病机制尚不明确。目前研究表明RAGE/AGEs配体系统在动脉粥样硬化的发生发展中起到了重要的作用。为了探讨RAGE/AGEs在OSAHS致动脉粥样硬化中的作用,本实验拟使用THP-1（人单核细胞白血病细胞）模拟IH导致动脉粥样硬化的体外细胞模型,使用RNA干扰法沉默THP-1细胞的RAGE基因表达,检测其对IH条件下的THP-1细胞单核细胞趋化、巨噬细胞转化、泡沫细胞细胞形成等的影响。方法:1.首先检测THP-1细胞在IH 0h、12h、24h、48h后RAGE、NF-kB p65、AGEs表达量。2.然后使用靶向RAGE的shRNA构建的慢病毒转染THP-1细胞,并筛选出沉默RAGE效率最高的稳定细胞株用于后续实验。实验分为四组:空白对照组:正常培养;实验对照组A:RA... 

【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校

【文章页数】：50 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

间歇缺氧0h、12h、24h、48h后THP-1细胞RAGE、NF-kBp65的表达

00）THP-1 细胞经 PMA（100ng/ml）诱导分化 24 小时后成RAGE 慢病毒转染及稳定细胞株筛选胞经慢病毒转染及嘌呤霉素筛选后获得稳定表达细挑选出最优干扰效率慢病毒（shRAN/RAGE1255）光图片如下：

图 4-3（×100）THP-1 细胞经 PMA（100ng/ml）诱导分化 24 小时后成为巨噬细胞4.4 shRNA/RAGE 慢病毒转染及稳定细胞株筛选THP-1 细胞经慢病毒转染及嘌呤霉素筛选后获得稳定表达细胞株并经 WB及 mRNA 验证挑选出最优干扰效率慢病毒（shRAN/RAGE1255）细胞株，最优稳定细胞株荧光图片如下：


本文编号：3418695