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自噬在同型半胱氨酸诱导人脐静脉内皮细胞衰老中的作用研究

发布时间:2021-10-06 15:57
  目的:研究自噬在同型半胱氨酸(Homocysteine,HCY)诱导人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)衰老中的作用。方法:分离原代HUVECs,体外培养传代,分组如下,第一部分:对照组(control),HCY组(浓度为25uM,100uM,500uM),5g/L D-半乳糖组,干预24h;第二部分:对照组,25uM HCY分别干预24h,36h,48h;第三部分:对照组,500uM HCY组,500uM HCY+100uM3-MA组,500uM HCY+5.5nM雷帕霉素组,DMSO对照组,干预24h。CCK-8试剂盒、细胞周期试剂盒、活性氧ROS试剂盒、细胞SA-β-Gal染色试剂盒、Stub-RFPSens-GFP-LC3自噬慢病毒转染分别检测细胞增殖活性、细胞周期、细胞内ROS、细胞SA-β-Gal染色、细胞自噬变化情况。结果:体外培养HUVECs,HCY以浓度及时间依赖方式抑制细胞增殖活性及细胞周期,增加细胞内ROS产生,增加细胞SA-β-Gal染色,增加细胞自噬点数(P<0.05),D-半乳糖... 

【文章来源】:新疆医科大学新疆维吾尔自治区

【文章页数】:45 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

自噬在同型半胱氨酸诱导人脐静脉内皮细胞衰老中的作用研究


原代内皮细胞

变化图,细胞增殖,乳糖,变化图


新疆医科大学硕士学位论文10注:与正常对照组比较,*P<0.05图2细胞增殖率随HCY浓度及D-半乳糖变化图(n=3,sx)Fig.2cellproliferateratechangewithconcentrationofHCYandD-galactose(n=3,sx)注:与正常对照组比较,*P<0.05图3细胞增殖活性随HCY作用时间变化图(n=3,sx)Fig.3cellproliferateratechangewithinterventiontimeofHCY(n=3,sx)注:与正常对照组比较*P<0.05,500uMHCY组与500uMHCY+雷帕霉素组比较+P<0.05,500uMHCY组与500uMHCY+3-MA组比较#P<0.05图4.500uMHCY及3-MA、雷帕霉素作用下细胞增值活性变化图(n=3,sx)Fig.4cellproliferateratechangewithinterventionof500uMHCY,3-MAandrapamycin(n=3,sx)

变化图,细胞增殖,变化图,作用时间


新疆医科大学硕士学位论文10注:与正常对照组比较,*P<0.05图2细胞增殖率随HCY浓度及D-半乳糖变化图(n=3,sx)Fig.2cellproliferateratechangewithconcentrationofHCYandD-galactose(n=3,sx)注:与正常对照组比较,*P<0.05图3细胞增殖活性随HCY作用时间变化图(n=3,sx)Fig.3cellproliferateratechangewithinterventiontimeofHCY(n=3,sx)注:与正常对照组比较*P<0.05,500uMHCY组与500uMHCY+雷帕霉素组比较+P<0.05,500uMHCY组与500uMHCY+3-MA组比较#P<0.05图4.500uMHCY及3-MA、雷帕霉素作用下细胞增值活性变化图(n=3,sx)Fig.4cellproliferateratechangewithinterventionof500uMHCY,3-MAandrapamycin(n=3,sx)

【参考文献】:
期刊论文
[1]硝化应激参与同型半胱氨酸诱导的血管内皮细胞自噬降低[J]. 周艺,严文静,甄攀攀,张赏月,王雯.  中南医学科学杂志. 2018(06)
[2]自噬促进骨髓间充质干细胞复制性衰老过程中衰老相关基因表达[J]. 吴尚蓉,郑勇,卓儒红,何柳,胡成俊.  中国组织化学与细胞化学杂志. 2018(01)
[3]高同型半胱氨酸血症相关疾病诊治[J]. 孟晓冬,刘燕.  中国老年学杂志. 2017(23)
[4]几种常见细胞衰老检测指标的比较[J]. 张译元,肖芳.  中国药理学与毒理学杂志. 2017(04)
[5]自噬流的检测方法[J]. 吕晓希,胡卓伟.  药学学报. 2016(01)
[6]Vascular endothelial dysfunction and pharmacological treatment[J]. Jin Bo Su.  World Journal of Cardiology. 2015(11)
[7]血管内皮细胞自噬在疾病发生发展中的作用[J]. 周彬,黄巧冰.  广东医学. 2013(19)
[8]同型半胱氨酸对人脐静脉内皮细胞自噬的影响及其意义[J]. 刘建兰,张东红,朱毅.  中国病理生理杂志. 2012(11)
[9]同型半胱氨酸加速内皮衰老的机制研究[J]. 张东红,刘建兰,朱毅.  中国病理生理杂志. 2012(11)

博士论文
[1]西格列汀通过抑制自噬过程改善高糖造成的血管内皮损伤[D]. 常鑫淼.北京协和医学院 2019
[2]STAT3/mTOR调控的自噬在血管紧张素Ⅱ诱导人肾小球系膜细胞衰老中的作用及机制[D]. 杨爽.中国医科大学 2018

硕士论文
[1]硫化氢上调SIRT1改善自噬流拮抗高糖诱导的HT22细胞衰老[D]. 陈颖.南华大学 2017



本文编号:3420324

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