p16甲基化在阿托伐他汀抑制VSMCs增殖迁移中的作用及机制研究

发布时间：2021-10-07 10:21

　　第一部分p16对阿托伐他汀抑制VSMCs增殖迁移作用的影响目的:研究阿托伐他汀对血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells,VSMCs）增殖迁移及凋亡的作用,以及p16在其中发挥的作用。方法:原代培养大鼠主动脉VSMCs并进行免疫荧光鉴定;以不同浓度阿托伐他汀（0、0.5、1.0、2.0μM）干预VSMCs,CCK-8检测阿托伐他汀对VSMCs增殖的作用;Transwell小室检测阿托伐他汀对VSMCs迁移的作用;Annexin-V/PI双染色法检测阿托伐他汀对VSMCs凋亡的作用;q-PCR及Western blot检测阿托伐他汀对p16、p53表达的影响;用短发夹RNA（sh RNA）沉默p16基因,观察p16介导阿托伐他汀对VSMCs增殖迁移的影响。结果:（1）与对照组相比,阿托伐他汀以浓度依赖性方式抑制VSMCs增殖迁移（P<0.05）;（2）与对照组相比,阿托伐他汀以浓度依赖性方式促进VSMCs凋亡,并上调p53蛋白表达;（3）与对照组相比,阿托伐他汀以浓度和时间依赖性方式上调p16 m RNA及蛋白表达（P<0.05）;（4）沉默p... 

【文章来源】：东南大学江苏省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

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【学位级别】：博士

【图文】：

大鼠主动脉VSMCs原代培养：7天后细胞爬出（×200）

图 1-2：显微镜下大鼠主动脉 VSMCs 形态，呈“谷峰”状生长（×200）。三、免疫荧光鉴定α-SM actin 是 VSMC 的标志性分子，第 3 代 VSMC 经免疫荧光染色后，使用荧光显微镜观察，使用荧光显微镜观察发出绿色荧光的 SM α-actin 沿纵轴呈肌丝状排列于细胞质内，细胞核蓝染，阳性细胞达 95%以上，表明细胞纯度较高（图1-3）。

免疫荧光检测SMα-actin在VSMC中的表达，标尺20μm


本文编号：3421863