冠心病患者血浆HDL组分中apoC-Ⅰ,SAA水平变化及SAA基因多态性研究
发布时间:2021-10-17 17:00
一、研究背景传统观念认为高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)是冠状动脉粥样硬化心脏病(冠心病)的保护因素,因此HDL-C成为降低心血管事件风险的研究热点。目前临床及相关研究,尤其是药物临床试验,大多以血浆HDL-C水平作为研究对象和评价指标,然而单纯血浆HDL-C水平难以反应其胆固醇的逆转运、抗炎、抗氧化、保护内皮细胞、抑制血栓形成等多效性功能。HDL-C组成具有明显的异质性,其中蛋白质成分是其多效性功能的主要承担者,如载脂蛋白A (apoA-I)是胆固醇逆转运功能的主体,抗氧化功能主要与对氧磷酶(PON-1)活性有关等。因此,有必要对HDL中发挥重要生物学功能的蛋白质组分进行研究。研究报道,炎性状态下HDL蛋白组成显著改变,促炎蛋白如血清淀粉酶A (SAA)、补体C3等含量明显升高,使HDL丧失保护功能向促动脉粥样硬化方向发展。既往研究证实,冠心病患者HDL的逆转运功能受损、抗炎能力降低。而冠心病状态下HDL蛋白质组分变化研究尚少,而且蛋白质组学的研究方法不同、结果差异较大,较大样本量研究更少。本实验室前期应用蛋白质组学iTRAQ技术筛选出冠心病组与非冠心病组HDL中13种差异表达蛋白。...
【文章来源】:北京协和医学院北京市 211工程院校 985工程院校
【文章页数】:108 页
【学位级别】:博士
【部分图文】:
超速离心后血菜内脂蛋白的分布
说明本研究超速离心法分离HDL无LDL、VLDL的污染;2.2用SDS-PAGE电泳鉴定HDL的纯度(图2)。与血衆样品比较,HDL样品泳道内没有白蛋白等高丰度蛋白(72 KD附近),HDL主要成分apoA-I的区域(约30KD)蛋白明显富集,说明超速离心法提取血架中的HDL能有效去除白蛋白等血架高丰度蛋白的污染。Marker HDL serum I I t80KD —^30KD 图2 超速离心HDL及血裝的SDS-PAGE电泳3. ELISA法测定HDL及血奖中apoC-1、SAA和补体C53.1图3-5为检测HDL样品中的apoC-I、SAA和补体C5时的标准曲线。三个标准曲线的相关系数均为1.00,提示ELISA检测过程中所测样品的浓度可信度非常高。34
ACS组和SCAD组显著高于对照组(P〈0.05),且ACS组显著高于SCAD组(P〈0.05),三组间log(HDL-SAA)均数分布趋势见图7,提示HDL-SAA可能与急性反应及疾病的进展有关。血装HDL中补体C5水平(HDL-C5):三组间log(HDL-C5)水平无统计学差异 CP =0.872)。表2.三组之间HDL样品屮apoOI和SAA的浓度比较(x土 SD) 对照组 SCAD组 ACS组变量P值(n =120) (n =65) (n =115)HDL-apoC-I (ng/mL) 45.18±7.42'^-^' 37.4± 10.33^'' 36.08±9.96^' <0.001log[HDL-SAA (ng/mL)] 1.16±0.38'''''' 1.32±0.43^'''''' LSSiO-eO*"'?' <0.001log[HDL-C5 (ng/mL)] 2.46±0.69 2.38±0.59 2.44±0.65 0.872备注:进行正态性检验示,SAA和补体C5呈偏态分布,对二者进行对数转换后呈正态分布,采用ANOVA检验。abp<0.05,SCAD组与对照组相比有统计学差异;a=p<0.05,ACS组与对照组相比有统计学差异;bep<0.05, SCAD组与ACS组相比有统计学差异
【参考文献】:
期刊论文
[1]血清淀粉样蛋白A与慢性疾病关系的研究进展[J]. 宋春华,穆云,马骏,郑芳. 中华老年医学杂志. 2011 (09)
[2]实验性早期心肌缺血补体C5的免疫组织化学研究[J]. 胡丙杰,陈玉川,祝家镇,毕启明,李杰,曾家乐. 中国法医学杂志. 2000(04)
本文编号:3442112
【文章来源】:北京协和医学院北京市 211工程院校 985工程院校
【文章页数】:108 页
【学位级别】:博士
【部分图文】:
超速离心后血菜内脂蛋白的分布
说明本研究超速离心法分离HDL无LDL、VLDL的污染;2.2用SDS-PAGE电泳鉴定HDL的纯度(图2)。与血衆样品比较,HDL样品泳道内没有白蛋白等高丰度蛋白(72 KD附近),HDL主要成分apoA-I的区域(约30KD)蛋白明显富集,说明超速离心法提取血架中的HDL能有效去除白蛋白等血架高丰度蛋白的污染。Marker HDL serum I I t80KD —^30KD 图2 超速离心HDL及血裝的SDS-PAGE电泳3. ELISA法测定HDL及血奖中apoC-1、SAA和补体C53.1图3-5为检测HDL样品中的apoC-I、SAA和补体C5时的标准曲线。三个标准曲线的相关系数均为1.00,提示ELISA检测过程中所测样品的浓度可信度非常高。34
ACS组和SCAD组显著高于对照组(P〈0.05),且ACS组显著高于SCAD组(P〈0.05),三组间log(HDL-SAA)均数分布趋势见图7,提示HDL-SAA可能与急性反应及疾病的进展有关。血装HDL中补体C5水平(HDL-C5):三组间log(HDL-C5)水平无统计学差异 CP =0.872)。表2.三组之间HDL样品屮apoOI和SAA的浓度比较(x土 SD) 对照组 SCAD组 ACS组变量P值(n =120) (n =65) (n =115)HDL-apoC-I (ng/mL) 45.18±7.42'^-^' 37.4± 10.33^'' 36.08±9.96^' <0.001log[HDL-SAA (ng/mL)] 1.16±0.38'''''' 1.32±0.43^'''''' LSSiO-eO*"'?' <0.001log[HDL-C5 (ng/mL)] 2.46±0.69 2.38±0.59 2.44±0.65 0.872备注:进行正态性检验示,SAA和补体C5呈偏态分布,对二者进行对数转换后呈正态分布,采用ANOVA检验。abp<0.05,SCAD组与对照组相比有统计学差异;a=p<0.05,ACS组与对照组相比有统计学差异;bep<0.05, SCAD组与ACS组相比有统计学差异
【参考文献】:
期刊论文
[1]血清淀粉样蛋白A与慢性疾病关系的研究进展[J]. 宋春华,穆云,马骏,郑芳. 中华老年医学杂志. 2011 (09)
[2]实验性早期心肌缺血补体C5的免疫组织化学研究[J]. 胡丙杰,陈玉川,祝家镇,毕启明,李杰,曾家乐. 中国法医学杂志. 2000(04)
本文编号:3442112
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