硝苯地平对ApoE -/- 小鼠RAW 264.7巨噬细胞源性胆固醇逆向转运的影响
发布时间：2021-10-22 07:52
背景与目的动脉粥样硬化（Atherosclerosis，AS）已成为引发心脑血管疾病的头号杀手，现已证明其为一种慢性炎症性疾病。当今，公认的抗动脉粥样硬化的机制主要包括三个方面，即内皮祖细胞的再生、血管壁的再生以及巨噬细胞调节的胆固醇逆向转运（reversecholesterol transport，RCT）。其中，RCT是目前最受关注的防御机制。胆固醇逆向转运是指机体将过多的胆固醇从外周细胞转运至肝脏，继而分泌至胆汁，最后经粪便排出体外的过程。近年研究显示，作为降压药物使用的长效L-型钙通道阻滞剂（Ca2+channel blocker,CCB）具有抗动脉粥样硬化作用，而硝苯地平作为传统的钙通道阻滞剂，已被证实其能改善冠脉循环及血管内皮功能，并具有抗动脉粥样硬化作用。然而CCB抗动脉粥样硬化作用是否与胆固醇逆向转运有关尚不十分清楚。据有关体外研究显示：硝苯地平通过刺激LXRα表达，增加LXRα下游基因ABCA1，ABCG1，SR-BI的表达，增强巨噬细胞胆固醇外流率，从而发挥抗动脉粥样硬化的作用。本研究拟在前期研究基础上，以载脂蛋白E基因敲除（Apo E-/-）小鼠为模型，深入探讨硝...
【文章来源】：中国人民解放军陆军军医大学重庆市
【文章页数】：80 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
胆固醇逆向转运过程：肝脏分泌贫脂的apoA-I在ABCA1的作用下可以迅速吸收胆固醇，贫脂的apoA-1同时也可以在ABCA1的作用下增强胆固醇从巨噬细胞的流出
验小鼠 北京大学动物中心方法及实验内容W 264.7 巨噬细胞的培养灯、酒精棉球、盐水瓶、试管架、细胞培养瓶、胶头滴物品放于超净工作台上，用紫外灯照射消毒 30min。的 RAW 264.7 巨噬细胞从-80℃冰箱中拿出来，放于 37℃细胞吸入离心管中，与低温离心机上以 1200rpm 离心 5m血清的 DMEM 高糖细胞培养液培养，于倒置显微镜下仔放于 37℃，5% CO2条件的孵箱中培养。 2~3 天用 PBS 漂洗细胞，更换新的培养液继续培养，当用 0.25%胰蛋白酶消化，1200rmp 离心 5min，弃去培养液照 1:3 比例传代（见图 2-1）。
图 2-2 标记[H3]-胆固醇的荷脂 RAW 264.7 巨噬细胞 ApoE-/-小鼠血脂蛋白浓度-小鼠腹腔注射标记有[H3]胆固醇的荷脂 RAW 264.7 巨噬细。用 0.9%氯化钠溶液配制的肝素钠溶液涂抹小鼠下颌下部入用涂有肝素溶液的抗凝管中，滴出 3~4 滴后用棉签给小止 2h 后 4000r/min 离心 5min，分离上层血浆，于全自动固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C-C)浓度。计学方法S 18.0 软件进行数据的统计分析，数据资料以 ±s 表示。
本文编号：3450680
【文章来源】：中国人民解放军陆军军医大学重庆市
【文章页数】：80 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
胆固醇逆向转运过程：肝脏分泌贫脂的apoA-I在ABCA1的作用下可以迅速吸收胆固醇，贫脂的apoA-1同时也可以在ABCA1的作用下增强胆固醇从巨噬细胞的流出
验小鼠 北京大学动物中心方法及实验内容W 264.7 巨噬细胞的培养灯、酒精棉球、盐水瓶、试管架、细胞培养瓶、胶头滴物品放于超净工作台上，用紫外灯照射消毒 30min。的 RAW 264.7 巨噬细胞从-80℃冰箱中拿出来，放于 37℃细胞吸入离心管中，与低温离心机上以 1200rpm 离心 5m血清的 DMEM 高糖细胞培养液培养，于倒置显微镜下仔放于 37℃，5% CO2条件的孵箱中培养。 2~3 天用 PBS 漂洗细胞，更换新的培养液继续培养，当用 0.25%胰蛋白酶消化，1200rmp 离心 5min，弃去培养液照 1:3 比例传代（见图 2-1）。
图 2-2 标记[H3]-胆固醇的荷脂 RAW 264.7 巨噬细胞 ApoE-/-小鼠血脂蛋白浓度-小鼠腹腔注射标记有[H3]胆固醇的荷脂 RAW 264.7 巨噬细。用 0.9%氯化钠溶液配制的肝素钠溶液涂抹小鼠下颌下部入用涂有肝素溶液的抗凝管中，滴出 3~4 滴后用棉签给小止 2h 后 4000r/min 离心 5min，分离上层血浆，于全自动固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C-C)浓度。计学方法S 18.0 软件进行数据的统计分析，数据资料以 ±s 表示。
本文编号：3450680
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