肺泡上皮细胞促进肺动脉平滑肌细胞增殖

发布时间：2021-10-29 13:06

　　目的观察低氧条件下肺泡上皮细胞对肺动脉平滑肌细胞（PASMCs）的作用。方法首先,低氧条件下培养肺泡上皮细胞48 h,采用WB法检测细胞中CX3CL1蛋白的表达,ELISA法检测细胞上清液中CX3CL1的浓度;其次,采用Transwell小室共培养肺泡上皮细胞和PASMCs 48 h,采用MTT法检测PASMCs增殖;最后利用siRNA沉默PASMCs的CX3CR1,采用MTT法检测PASMCs增殖。结果与对照组比较,肺泡上皮细胞在低氧处理48 h后,CX3CL1蛋白表达、细胞上清液中CX3CL1浓度明显增加（P<0.05）;与对照组相比,PASMCs与肺泡上皮细胞共培养48 h后,PASMCs增殖明显增加（P<0.05）; siRNA沉默后的PASMCs与大鼠肺泡上皮细胞共培养48 h后,PASMCs增殖无明显增加（P>0.05）。结论低氧条件下肺泡上皮细胞通过CX3CL1促进PASMCs增殖。 

【文章来源】：心血管病学进展. 2020,41(10)

【文章页数】：5 页

【部分图文】：

免疫荧光大鼠肺动脉平滑肌细胞(×400)

无菌条件下，用10%水合氯醛1 m L麻醉SD大鼠，切开主支气管，用注射器吸50 m L磷酸盐平衡生理盐水灌注肺，直至肺变白，分离肺组织，并将肺组织切成1 mm3片段后放入含血清培养基中。震荡离心过滤后，将肺组织接种于Ig G包被一次性无菌培养基中，孵育2 h。离心后取上清液，收集细胞接种于6孔培养板上，放入培养箱。采用AECs特异性抗体抗(表面活性物质相关蛋白C) SFTPC进行免疫荧光染色，胞浆呈现绿色荧光(图2)。1.2.3 Western印迹法检测细胞CX3CR1含量

本实验选取2～3代AECs，分别于常氧与低氧环境下培养48 h，采用WB检测AECs CX3CL1表达量，采用ELISA法检测培养上清液CX3CL1含量。与常氧组比较，大鼠AECs经低氧处理48 h后，CX3CL1蛋白表达、细胞上清液中CX3CL1浓度明显增加(图3)。2.4 大鼠AECs对PASMCs增殖有影响

【参考文献】：
期刊论文
[1]活性氧对高原性肺动脉高压的影响[J]. 张国振,何庆.  心血管病学进展. 2018(04)
[2]FKN浓度对人脐静脉内皮细胞中CX3CR1表达的影响[J]. 王领,赵一蔚,任培乐,刘蕾娜,杨盼,李静,雷冬玉,聂永梅.  新疆医科大学学报. 2018(04)
[3]低氧对大鼠肺动脉平滑肌细胞和肺微血管内皮细胞表达及分泌fractalkine的影响[J]. 陈小菊,程德云,樊莉莉.  四川大学学报(医学版). 2012(05)

博士论文
[1]肺泡上皮细胞在低氧性肺动脉高压中的作用及机制研究[D]. 王艳霞.中国人民解放军空军军医大学 2018



本文编号：3464714