miRNA-28靶向调控ALDH2促小鼠心肌缺血的机制研究及补阳还五汤对心肌的保护作用

发布时间：2021-11-01 05:21

　　研究背景和目的急性心肌梗死（AMI）后随之出现的左心功能不全和心脏衰竭,具有较高的发病率和死亡率[1]。心梗后临床干预措施是有效地打开闭塞的血管和重建冠状动脉血流,如血管成形术或溶栓药物。然而,其对减轻缺血期或再灌注时的心肌损伤疗效不确切。大量的研究已经证实,线粒体酶乙醛脱氢酶-2（ALDH2）是一种参与保护心脏的关键酶,它通过介导激活醛,如乙醛和4-羟基-2-壬烯醛（4-HNE）的解毒以及硝酸甘油的生物活化（GTN）[2,3]而发挥作用。过度表达的ALDH2野生型酶可对心脏组织和心脏功能产生多种有益的影响。高表达的ALDH2可保护心脏免受乙醛的毒性和急性乙醇中毒所致心肌损害[4,5]。在ALDH2基因敲除小鼠中不能检测出ALDH2的酶活性,乙醇灌胃后乙醛的水平明显升高,因此,这种小鼠对酒精和乙醛引起的毒性和损害比野生型小鼠更敏感[6,7]。既往的实验和临床研究已经发现,ALDH2惰性的人比ALDH2功能正常的人食用酒精或/和吸入乙醛有更高的风险。ALDH2缺陷之人习惯性饮酒有较高的患癌症的风险[8-10]。然而,ALDH2野生型基因的具体调节机制尚不清楚。微小RNA（miRNAs）长... 

【文章来源】：南方医科大学广东省

【文章页数】：105 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图１－３部分总ＲＮＡ?１％琼脂糖凝胶电泳??

?第一章?ＡＬＤＨ２是ｎｉｉＲ－２８的靶基因???－ＨＴｆｆｌ??图１－３部分总ＲＮＡ?１％琼脂糖凝胶电泳??Ｆｉｇｕｒｅ?１－３?１％?ａｇｒｏｓｅ?ｇｅｌ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｏｆ?ｔｏｔａｌ?ＲＮＡ??根据目的基因和内参照Ｕ６的扩张曲线，得到各自的Ｃｔ值，计算基因表达水平。??在常氧条件下，小鼠心肌细胞中内源性ｍｉＲ－２８表达较低；乏氧培养后，细胞株??ｍｉＲ－２８的Ｃｔ值随时间的延长而减小，乏氧１２ｈ时，细胞Ｃｔ值最小，此后Ｃｔ值增大。??这表明乏氧后细胞ｍＲ－２８表达增加，乏氧１２ｈ后细胞株ｍｉＲ－２８表达水ｆ最高，随??着乏氧时间的延长ｍｉＲ－２８表达再次降低（图卜４）。经单因素方差分析可知，５个时??间点的ｍｉＲ－２８表达量总体有显著差异（Ｆ＝２］?１．４１，?Ｐ＜０．０１）（表］－１?），进－步做ＳＮＫ??多重比较发现，除第６小时和第２４小时的表达量无差异外，其余各个时间点之间??的表达量差异都有显著意义（Ｐ＜〇．〇５）。而ＡＬＤＨ２的表达却以乏氧时间依赖的方??式而降低（图１－５）。经单因素方差分析可知，５个时间点的ＡＬＤＨ２的表达量总体有??显著差异（Ｆ＝１Ｉ４．４２，?Ｐ＜０．０１）（表卜２），进一？步做ＳＮＫ多重比较发现，除第０小??时与其他时间的表达量差异有显著（Ｐ＜〇．〇５）差异外，其余各个时间点之间的表??达量都无显著性差异。??基８?ｒ??３?６?－?由??１?－?ｎ?内??！?２?－?ｐｈ??■Ｉ?０１?门」１?．．?Ｕ．．?Ｕ?．?Ｕ?，??２?Ｏｈ?３ｈ?６ｈ?１２ｈ?２４ｈ??图１－４．实时定量ＲＴ－ＰＣＲ法检测小鼠心肌细胞中ｎｕＲ－２８的表

图１－５．实时定ｍ?ＲＴ－ＰＣＲ法检测ＡＬＤＨ２?ｍＲＮＡ的表达??


本文编号：3469576