microRNA-221调控Tip血管内皮细胞成血管效应的分子机制研究

发布时间：2021-11-04 00:09

　　第一部分人外周血内皮祖细胞及Tip血管内皮细胞的分离培养与鉴定目的：探讨人外周血内皮祖细胞的分离与培养方法,拟证实人外周血是内皮祖细胞除了骨髓以外的另一个理想来源。并在一定的体外培养条件下将外周血内皮祖细胞定向诱导分化为Tip血管内皮细胞,研究其生物学活性,不仅为进一步实验研究提供所需的细胞来源,还为干细胞源性血管新生机制提供可靠的实验室依据。方法：采用Ficoll密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞,将其重悬于EGM-2-MV培养基中培养,每日于倒置相差显微镜下观察细胞的生长形态及内皮祖细胞集落形成形态,每隔3-4天换一次液,培养7天后收集贴壁细胞,根据内皮祖细胞特性,用流式细胞仪检测内皮祖细胞特异性抗原CD34、CD133及VEGFR等表面标志物以鉴定培养诱导后细胞主要为内皮祖细胞。培养至21天时倒置相差显微镜下观察Tip血管内皮细胞形态,并收集该时期的贴壁细胞进行RT-PCR检测Tip血管内皮细胞中vWF、eNOS等血管内皮细胞系特异性基因的表达情况。结果：分离获得的外周血单个核细胞培养4天后多数呈贴壁生长,7天后形成梭状的内皮样细胞,部分细胞积聚成团形成克隆集落,流式细胞仪鉴定... 

【文章来源】：昆明医科大学云南省

【文章页数】：51 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
主要缩略词
中文摘要
Abstract
引言
第一部分
    前言
    材料与方法
    结果
    讨论
    结论
    参考文献
第二部分
    前言
    材料与方法
    结果
    讨论
    结论
    参考文献
特色与创新
综述
    参考文献
硕士期间发表论文
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]半乳糖凝集素-3对干细胞源性Tip血管内皮细胞增殖能力的影响[J]. 李珊姗,杨镛,杨国凯,万嘉,马振桓,李国剑,陆平,杨光.  中华实验外科杂志. 2012 (12)
[2]细胞-动物缺血缺氧模型建立及特点[J]. 谢海亮,杨镛.  中国血管外科杂志(电子版). 2012(03)
[3]Galectin-3对外周血内皮祖细胞源性血管内皮细胞增殖能力的影响[J]. 李珊姗,杨镛.  中国普外基础与临床杂志. 2012(07)
[4]SDF-1/CXCR4调控Tip内皮细胞成血管效应的研究进展[J]. 杜玲娟,杨镛.  中国血管外科杂志(电子版). 2011(03)
[5]外周血干细胞移植治疗血栓闭塞性脉管炎[J]. 杨国凯,杨镛,何晓明,罗开元,万嘉,杨光,李国剑,马震寰,陆平.  中国微创外科杂志. 2009(09)
[6]人自体干细胞移植在重症肢体缺血血流重建中的疗效与评价[J]. 杨镛,陆平,何晓明,杨国凯,罗开元,段志泉,时德.  中国普外基础与临床杂志. 2009(02)
[7]Adult endothelial progenitor cells from human peripheral blood maintain monocyte/macrophage function throughout in vitro culture[J]. Shi Ju Zhang~1 Hao Zhang~1 Ying Jie Wei~1 Wen Jun Su~1 Zhong Kai Liao~1 Mai Hou~1 Jian Ye Zhou~1 Sheng Shou Hu~1 Research Center for Cardiovascular Regenerative Medicine,Ministry of Health,and Department of Cardiovascular Surgery,Cardiovascular Institute and Fu-Wai Hospital,PUMC and CAMS,167 Beilishi Road.West District,Beijing 10003 7 China.  Cell Research. 2006(06)
[8]阻抑正常骨髓基质SDF-1作用对HL-60细胞生物学性质的影响[J]. 魏立,孔佩艳,陈幸华,彭贤贵,常城,曾东风,刘红,刘林,王庆余,张怡.  第三军医大学学报. 2004(23)



本文编号：3474605