CGRP调节GSK3-β/β-catenin促进MSCs存活及分化的实验研究

发布时间：2021-11-09 06:21

　　目的：急性心肌梗死后心肌细胞发生死亡，瘢痕组织增生使心脏收缩功能受损，近年来干细胞移植疗法修复梗死的心肌成为研究的热点，其中MSCs因其自身具有自我更新、增殖及多向分化能力，多个研究表明其在心肌梗死治疗中具有显著疗效。但同时也有阴性结果表明在心肌梗死急性期移植MSCs后，心功能并未得到改善。分析原因认为主要是心肌梗死后的心脏处于氧化应激环境中，不利于移植的MSCs存活、增殖及分化，极大地减弱了MSCs治疗MI的疗效。如何提高MSCs的移植存活率成为解决问题的关键。研究者发现CGRP从旁分泌心肌及血管营养因子、促进血管新生、抗VSMCs增殖、促进凋亡及抗心肌细胞凋亡等方面减小梗死面积，改善心功能。Wnt广泛分布于心脏，调节心脏的发育与生长，当心脏处于应激状态时被激活，参与心肌梗死后一系列的病理生理变化。调节Wnt信号下游GSK-3β磷酸化，促进β-catenin核蓄积可启动一系列增殖、存活及分化靶基因的表达。本实验的目的就是研究CGRP是否可调控MSCs的命运而加强其治疗急心心肌梗死的疗效，其中涉及的机制是否与GSK-3β/β-catenin信号通路有关？方法：1.小鼠断颈处死、剥离股骨... 

【文章来源】：遵义医科大学贵州省

【文章页数】：73 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

原代与传代培养细胞注：A新分离获得的原代骨髓细胞；B培养第5天原代细胞；C培养第9天原代细胞；D传代培养24h细胞2.1.2培养细胞生长曲线

图 2 MSCs 生长曲线曲线 细胞表面抗原标记检测流式细胞仪检测细胞表面抗原标记，如图 3 结果显示，这些细胞高表达D90 抗原标记（分别为 97.4%和 98.0%），而很少表达 CD45 抗原标记（为 定义为 MSC。

29图 3 第 3 代培养细胞表面抗原标记检测2 CGRP 抗 H2O2诱导 MSCs 凋亡.1 流式细胞仪法检测不同浓度 H2O2诱导 MSCs 凋亡和（或）死亡以不同浓度的 H2O2（25、50、100、200、400μmol/L）诱导 MSCs 凋亡 2h 后，流式细胞仪法检测各组细胞凋亡与坏死情况（表 1 及图 5 A—F）。结果发现 H2O2细胞存活率均低于对照组（P<0.01），100μM H2O2及 200μM H2O2组间存活率差异统计学意义（P>0.05），其余组间存活率趋势为：25μM H2O2>50μM H2O2>100μMO2、200μM H2O2>400μM H2O2（P<0.01）；对照组（2.867±0.145）早期凋亡率低于


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