FOXO4通过Chop介导凋亡在H9C2细胞缺氧/复氧（HR）中的机制研究

发布时间：2021-11-12 07:28

　　目的:研究缺氧复氧（HR）条件下H9C2细胞中FOXO4与Chop依赖的凋亡通路的关系方法:首先建立H9C2细胞缺氧复氧模型。在缺氧复氧的情况下分步进行实验。第一部分:FOXO4 siRNA干扰,分组为a.正常组（control）b.缺氧复氧组（HR）c.HR+阴性病毒d.HR+FOXO4-siRNA;第二部分:Chop siRNA干扰,分组为:a.HR+阴性干扰片段b.HR+Chop-siRNA;第三部分:FOXO4-siRNA+Chop-过表达质粒,分组为a.正常组（control）b.缺氧复氧组（HR）c.HR+阴性d.HR+FOXO4-siRNA+Chop-过表达质粒。采用TUNEL检测凋亡情况;Western Blot检测各组FOXO4、Chop、Cleaved-caspase3蛋白表达情况;CHIP检测FOXO4与Chop的结合位点。结果:（1）在缺氧复氧条件下,H9C2细胞中FOXO4、Chop、Cleaved-caspase3蛋白表达较正常组明显升高（p<0.05）,TUNEL检测凋亡水平也明显升高（p<0.05）。（2）沉默FOXO4后进行缺氧复氧处理,F... 

【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校

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【学位级别】：硕士

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慢病毒沉默FOXO4对缺氧复氧条件下Chop、Cleaved-caspase3蛋白表达的影响

第 3 章 结果升高，FOXO4-siRNA 组与 FOXO4-Negative 组相比 FOXO4、Chop、Cleaved-caspase 3 表达量明显降低。C-D：显示 A 的 WB 结果相对应的柱状图。E：显示 B 的 WB 结果相对应的柱状图。*表示 HR 组与正常组相比，p＜0.05；** 表示 HR 组与正常组相比，p＜0.01；# 表示慢病毒沉默 FOXO4 缺氧复氧组与阴性病毒缺氧复氧组相比，p＜0.05；##表示表示慢病毒沉默 FOXO4 缺氧复氧组与阴性病毒缺氧复氧组相比，p＜0.01。

图 3：转染不同 Chop-siRNA 干扰片段对 Chop 蛋白表达的影响A：WB 结果显示 Chop-siRNA 246 干扰使 Chop 蛋白表达最低。B：显示 A 图相对应的柱状图。**表示 Chop-siRNA 246 与正常组相比，p＜0.01;##表示 Chop-siRNA 463 与正常组相比，p＜0.01;$$ 表示 Chop-siRNA583 与正常组相比，p＜0.01。3.3 转染 Chop-siRNA 246 干扰片段对缺氧复氧条件下 Chop 蛋白表达的影响分别转染 Chop 阴性干扰片段、Chop-siRNA 至 H9C2 细胞内，48 小时后进行缺氧复氧处理。图四结果显示转染 siRNA 后，Chop、Cleaved-caspase3 蛋白表达量在缺氧复氧条件下较转染 Chop 阴性干扰片段组相比明显降低，差异具有统计学意义（p＜0.01）。


本文编号：3490446