降低血小板mTORCl活性减缓小鼠静脉血栓形成及机制研究

发布时间：2021-11-16 11:46

　　背景:全球人口老龄化正在加剧,将成为二十一世纪社会面临的重大挑战。静脉栓塞性疾病如深静脉血栓（DVT）的发病率升高与衰老息息相关,是老年群体致死（残）率升高的主要原因。血小板过度活化与衰老依赖的静脉栓塞形成有关。然而,目前对衰老时血小板活化增强和静脉血栓形成敏感性增加的机制尚未阐明。方法与结果:1:为了阐明血小板mTORC1在年龄相关的静脉血栓形成中的作用,我们首先探究了小鼠中年龄与血小板和巨核细胞mTORC1活性的关系。与年轻（4月龄）小鼠相比,老年（16个月龄）小鼠血小板经凝血酶诱导后,免疫印迹显示P-P70S6K（T389）和PS6（S235/236）表达上调。流式分析显示老年小鼠巨核细胞P-P70S6K（T389）和P-S6（S235/236）表达也较年轻鼠增加。以上结果表明,巨核细胞和血小板中的mTORC1活性随着年龄的增长而增加。2:而后,我们探究了雷帕霉素对年轻（4月龄）和老龄（16月龄）小鼠的深静脉血栓形成的影响。结果表明,与年轻小鼠相比,老年小鼠形成更大、更重的血栓。有趣的是,对4月龄小鼠给予雷帕霉素处理并未影响年轻小鼠的血栓形成。然而,对16月龄小鼠给予雷帕霉素处理... 

【文章来源】：南方医科大学广东省

【文章页数】：117 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图１－２巨核细胞生成示意图??Ｆｉｇ?１．２?Ｔｈｅ?ｍｅｇａｋａｒｙｏｃｙｔｏｐｏｉｅｔｉｃ?ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ?ｐａｔｈｗａｙ??

图１－３血小板活化信号通路图??Ｆｉｇｌ．３?Ｐｌａｔｅｌｅｔ?ｓｉｇｎａｌｉｎｇ?ｐａｔｈｗａｙｓ??血小板信号传导途径：ＡＤＰ、凝血酶和ＴＸＡ２通过Ｇ－蛋白偶联受体（Ｇｉ－，Ｇｑ－，Ｇ１３－）激??活信号级联反应，最终引起钙调激酶的活性增加，导致颗粒物的分泌、整合素激活及聚集。??凝血酶激活蛋白酶活化受体（ＰＡＲ），?ＡＤＰ激活Ｐ２Ｙ１和Ｐ２Ｙ１２，?ＴＸＡ２激活ＴＰ受体，引起??ＧＰＩＩｂ?／?Ｉｌｉａ?（?ｌｉｂ?３）激活，与纤维蛋白原连接并形成富含血小板的血栓。血小板对各种??刺激物的分泌应答依赖Ｃａ２＋，?ＰＫＣ和ＰＩ－３－Ｋ途径的协同激活。Ｐ２Ｘ１受体是配体门控离子??通道，在血小板形状改变中发挥作用。胶原蛋白和ｖＷＦ与ＧＰＶＩ和ＧＰＩｂ／ＩＸ／Ｖ受体结合，??增加粘附的稳定性。ＡＣ：腺苷酸环化酶；ＤＡＧ：二酰基甘油；ＭＬＣＫ：肌球蛋白轻链激酶；??ＰＡＲ：蛋白酶激活受体；ＰＩ－３Ｋ：磷脂酰肌醇－３－激酶；ＰＩＰ３：磷脂酰肌醇－３，４，５－三磷酸；ＰＬＣ：??磷脂酶Ｃ；?ＰＫＣ：蛋白激酶Ｃ；?ＲｈｏＡ：小ＧＴＰ结合蛋白；ＴＰ：血栓烧／前列腺素类受体。（引??自?Ｔｅｓｆａｍａｒｉａｍ．?Ｂ．?Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ?Ｒｅｖａｓｃ?Ｍｅｄ?（２００８），９，２，７８－８７）。??－－－－－

图１－４血小板在血栓形成中的作用??Ｆｉｇ?１－４?Ｐｌａｔｅｌｅｔｓ?ｉｎ?ｔｈｒｏｍｂｕｓ?ｆｏｒｍａｔｉｏｎ??血小板在血栓形成中是示意图：在静息状态时，血小板表面整连蛋白以无活性状态存在。??一旦血管受损，活化的血小板沿内皮下基质滚动，然后将糖蛋白（ＧＰ）?Ｉｂａ（ＧＰＩｂ／ＩＸ／复合物的亚基）与ｖＷＦ结合起来。与胶原带白接触后，血小板通过ＧＰＶＩ和ＧＰＩａ／ＩＩａ受被激活，并释放二级激动剂（ＡＤＰ、ＴＸＡ２和凝血酶），从而招募至更多的血小板。活化ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａ结合多种配体，包括纤维蛋白原（Ｆｇ），?ｖＷＦ和纤连蛋白导致血栓生长。可溶ＣＤ４０配体（ＳＣＤ４０Ｌ）和Ｐ－选择素经蛋白酶加工水解从血小板表面脱落下来，血小板衍的微粒与组织因子（ＴＦ）和Ｐ－选择素配体（ＰＳＧＬ）发生结合。（引自Ｔｅｓｆａｍａｒｉａｍ，?Ｂ．?ＣａｒｄｉｏｖａｓＲｅｖａｓｃ?Ｍｅｄ?（２００８），９，２，７８－８７）。??Ｐｌａｔｅｌｅｔｓ?ｉｎ?ｔｈｒｏｍｂｕｓ?ｆｏｒｍａｔｉｏｎ：?Ｉｎ?ｒｅｓｔｉｎｇ?ｐｌａｔｅｌｅｔｓ，?ｉｎｔｅｇｒｉｎｓ?ａｒｅ?ｐｒｅｓｅｎｔ?ｉｎ?ｉｎａｃｔｉｖｅ?ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏＩｎ?ｉｎｊｕｒｅｄ?ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｕｍ，?ａｃｔｉｖａｔｅｄ?ｐｌａｔｅｌｅｔｓ?ｒｏｌｌ?ａｌｏｎｇ?ｔｈｅ?ｓｕｂｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｉ?ｍａｔｒｉｘ，?ｆｏｌｌｏｗｅｄ?ｂｙ?ｔｈｔｅｔｈｅｒｉｎｇ?ｏｆ?ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ?（ＧＰ）?Ｉｂａ，?ａ?ｓｕｂｕｎｉｔ?ｏｆ?ｔｈｅ?ＧＰＩｂ／ＩＸＡ＾?ｃｏｍｐｌｅｘ，?ｔｏ?ｖＷＦ．?Ｕｐｏｎ?ｃｏｎｔａｃｗｉｔｈ?ｃｏｌｌａｇｅｎ，?ｐｌａｔｅｌｅｔｓ?ｂｅｃｏｍｅ?ａｃｔ


本文编号：3498822