盐酸异丙肾上腺素诱导的心肌肥大中环状RNA的表达

发布时间：2021-11-18 21:18

　　研究背景心肌肥大被认为是心脏对于各种生理性以及病理性刺激的一种适应性改变,其特征主要包括胚胎发育标志基因的重新激活、心肌细胞体积增大、蛋白质合成显著升高以及收缩蛋白的种类发生相应改变等。虽然最初心肌肥大是为了满足心脏在超负荷压力下的需求而发生的一种代偿性的生理变化,但它并不是无限度的。由于肥大的心肌需氧量逐渐增加,而冠状动脉的供血量不足从而造成肥大部分心肌的缺血,进而造成心肌收缩功能减弱,最终导致一系列心血管疾病,因此心肌肥大被认为是诱发众多重大心血管疾病的危险因素之一。然而目前临床上仍缺乏有效预防方法和治疗手段。因此,深入探究心肌肥大发生的分子机制,以期为临床预防与治疗提供新的理论依据。环状RNA作为近年来一种新发现的非编码RNA（ncRNA）,是真核生物中共价闭合的内源性生物分子,具有组织特异性和细胞特异性表达模式。环状RNA由于其独特的环状结构不易被核酸外切酶降解而更加稳定,因而具有更长的半衰期。由于目前已知的某些环状RNA在表达上比较丰富,且在进化上相对保守,而逐渐成为ncRNA领域的研究热点。研究表明,环状RNA主要通过吸附miRNA来调节下游靶基因的表达,也可通过调控基因转... 

【文章来源】：郑州大学河南省 211工程院校

【文章页数】：70 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图４．２?ＩＳＯ诱导对小鼠心室中ＡＮＦ和ｍｉＲ－２３ａ表达情况的影响??

?实验结果???４１８?Ｉ?１４Ｓ４?！?１４４１?（?｜；?ｆ?＾??：?＾ｉｎ？ｒ??ｃｏｎｔｒｏｌ?ｉｓｏ?ｃｏｎｔｒｏｌ?Ｉｓｏ??Ｃ????＾一??餐萝．．＇?．．．．．．…＃．??图４．?３环状ＲＮＡ表达谱??（Ａ）两组测序结果中环状ＲＮＡ的维恩图；（Ｂ?）通过将环状ＲＮＡ序列比对到小鼠基因组??上得到其分类占比：（Ｃ）?Ｃｉｒｃｏｓ图上显示环状ＲＮＡ在小鼠染色体上的分布。最外层代表??小鼠所有的染色体，每３个内层代表同？组中每个样品的环状ＲＮＡ分布。Ｃｏｎｔｒｏｌ：生理盐??水处理组，ＩＳＯ：异丙肾上腺素处理组，ｎ＝３。??４．３?ＩＳＯ诱导使心室环状ＲＮＡ表达谱发生改变??从图４．３的结果我们己经知道对照组和］ＳＯ处理组小鼠心室环状ＲＮＡ表达??谱并不是完全相同的，所以我们推测ＩＳＯ能够影响环状ＲＮＡ的表达。通过对两??组共表达的１４６４个环状ＲＮＡ进一步分析，我们发现在其中有１１９个环状ＲＮＡ??表达发生了明显的改变。结果如图４．４Ａ所示，相比于对照组，其中的８９个环状??ＲＮＡ发生上调，３０个环状ＲＮＡ发生下调。随后我们从其中挑选了一部分表达??差异比较显著的环状ＲＮＡ以热图进行展示，其结果如图４．４Ｂ所示。综上所述，??ＩＳＯ能够影响心室环状ＲＮＡ的表达。??２１??

ｌｃ３８ａ１??０）?Ｉ?Ｉ?丨护，痛！??ｃｉｒ－ｊｍｊｃＪ１ｃ??ｃｉｒ－ｋａｌｍ??ｃｉｒ－ｍｂｏａｔ２??．：＞ｉ?ｉ总．??，Ｃ＃＊Ｉ?Ｉ?４ＥｊＴ?Ｃｉｒ－ａｒｈ９ａｐ２６??？????Ｖｉ?＞ｙｖ＿?ＵＨＶ＊??［ＳＳ?ｖ??ｍ?Ｖ?Ｗ?＇?ＬｒＴＭ?—＾??？ｆ?＾?￥：＝ＰｐＰｉｃ？??〇－｜?１?＿？严丨?１?１?ｃｉｒ－ｎｌｎ??Ｉ＾＾ＨＩＨＨｉ?％＼ｒｒ：＾〇２??ｌｏｇ２ＦＣ?ｌｏｗ?—１＾—?ｈｉｇｈ??图４．４异丙肾上腺素处理后差异表达的环状ＲＮＡ??（Ａ）相比于ｃｏｎｔｒｏｌ组，ＩＳＯ处理后差异表达环状ＲＮＡ的火山图。ＦＣ?（Ｆｏｌｄ?ｃｈａｎｇｅｓ）为２??倍及以上并且Ｐ＜０．０５被认为是有显著差异，显著上调和下调的分别用红点和绿点表示。（Ｂ）??一部分在ｃｏｎｔｒｏｌ和ＩＳＯ组中表达发生显著变化的环状ＲＮＡ热图。红色代表上调，绿色代??表下调，表达量越高颜色越深，ｎ＝３。??４．４对环状ＲＮＡ测序结果的验证??接下来对ＲＮＡ－ｓｅｑ中差异表达的环状ＲＮＡ的真实性和可靠性进行验证，我??们挑选６个表达发生显著变化的环状ＲＮＡ进行验证，它们分别是ｍｍｕ－ｃｉｒｃＲＮＡ??ｗｗｐｌ、ｍｍｕ－ｃｉｒｃＲＮＡ?ｉｆｔ８１、ｍｍｕ－ｃｉｒｃＲＮＡ?ｔｒａｐｐｃ９、ｍｍｕ－ｃｉｒｃＲＮＡ?ｋｌｃｌ、??ｍｍｕ－ｃｉｒｃＲＮＡ?ｓｈ３ｒｆ３?和?ｍｍｕ－ｃｉｒｃＲＮＡ?２０７０２。为了保证环状?ＲＮＡ?的特异性扩增，??我们对每个环状ＲＮＡ都设计了一对ｄｉｖｅｒｇｅｎｔ?ｐｒｉｍｅｒ和一对ｃｏｎｖｅｒｇｅｎｔ?ｐｒｉｍｅｒ，??以小鼠ｃＤＮＡ和基因组Ｄ


本文编号：3503626