细胞周期蛋白依赖性激酶9（CDK9）在肺动脉高压中的作用及机制研究

发布时间：2021-11-22 19:04

　　背景:肺动脉高压（Pulmonary artery hypertension,PAH）是一类严重的心肺血管疾病,临床麻醉风险很高。肺血管重塑和肺动脉平滑肌的过度增殖构成肺动脉高压的重要病理特征。研究提示肺动脉平滑肌过度增殖和肿瘤存在相似性,目前细胞周期蛋白依赖性激酶9（CDK9）是重要的抗肿瘤靶点,但是CDK9在肺动脉高压中的作用目前尚不清楚。目的:探究肺动脉高压中CDK9在肺动脉平滑肌中的表达改变及CDK9抑制剂对肺动脉高压中肺血管重塑和肺动脉平滑肌过度增殖的影响及潜在分子机制。方法:采用在体肺动脉高压模型和体外培养人肺动脉平滑肌细胞（HPASMC）缺氧模型研究肺动脉高压肺动脉平滑肌中CDK9的表达变化。在体实验采用成年雄性SD大鼠腹腔单次注射野百合碱（MCT,60mg/kg,ip）成功制作肺动脉高压模型。剥离正常对照组及MCT组大鼠的肺动脉,采用RT-PCR和Western-Blot法分别检测肺动脉中CDK9 mRNA和蛋白表达水平。体外模型以培养HPASMC为研究对象,分别3%O₂,5%CO₂体外缺氧（Hypoxia）处理0、1、3、6... 

【文章来源】：华中科技大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

MCT组大鼠肺动脉组织中CDK9mRNA和蛋白表达水平升高

图 2. HPASMC 在体外缺氧 24h 后 CDK9 表达上调。A：HPASMC 缺氧 24h 后 CDK9mRNA 表达统计结果；B：HPASMC 不同时间（0，1，3，6，12，24h）缺氧后 CDK9蛋白表达改变；C：HPASMC（0，1，3，6，12，24h）缺氧后 CDK9 蛋白表达统计结果 * P<0.05，n=3。2.CDK9 抑制剂 Flavopiridol 缓解野百合碱诱导大鼠肺动脉高压2.1 Flavopiridol 降低大鼠肺动脉高压中右心室收缩压（RVSP）21 天肺动脉高压建模结束后，检测三组大鼠 RVSP 水平，结果显示，与 Control组相比，MCT 组大鼠 RVSP 显著增加（35.11 ±2.32mmHg vs 17.70 ±0.46mmHg，P<0.001），使用 CDK9 抑制剂 Flavoripidol 处理后，虽未恢复至正常水平，但相较于MCT 组大鼠，右心室收缩压有一定程度的下降（ 24.40 ± 1.28mmHg vs 35.11 ±2.32mmHg，P<0.01），肺动脉高压得到一定缓解。

图3.CDK9抑制剂Flavopiridol降低大鼠肺动脉高压中右心室收缩压（RVSP）。A：Control组大鼠右心室收缩压波形；B：MCT组大鼠右心室收缩压波形；C：MCT+Fla组大鼠右心室收缩压波形；D：右心室收缩压统计分析 ***P<0.001，**P<0.01，n=6。2.2 Flavopiridol 抑制大鼠肺动脉高压中右心室肥厚取三组大鼠心脏，称量并计算右心室肥厚指数（RV／LV+S）。如图 4.1 所示，MCT 组大鼠与 Control 组比较，其 RV／LV+S 显著增加（0.57 ±0.05 vs 0.27 ±0.01，P<0.01）。使用 Flavopiridol 干预后，相比于 MCT 组大鼠有一定程度的降低（0.45 ±0.03 vs 0.57 ±0.05，P<0.01）。图 4.2 所示，大鼠心脏固定后 HE 染色，在显微镜下进行观察。三组大鼠心脏横截面进行比较，MCT 组大鼠心脏右心室比对照组明显增厚，使用 Flavopiridol 后，心脏右心室厚度降低。


本文编号：3512279