BMP9联合Wnt3a诱导C3H10T1/2细胞向心肌细胞样细胞分化的研究

发布时间：2021-12-02 05:17

　　第一部分扩增重组腺病毒GFP、Wnt3a、BMP9并分别转染C3H10T1/2细胞目的：扩增能高度表达GFP、Wnt3a、BMP9蛋白的重组腺病毒,并检测分别转染C3H10T1/2细胞后的稳定性。方法：复苏HEK293细胞并培养,待其增殖生长至约培养瓶底面积的70%～80%,进行反复传代两次后,向细胞中分别加入适量的AdEasyGFP、AdEasyWnt3a、AdEasyBMP9原液,摇晃均匀后培养48-72h观察细胞形态发生了明显的改变后,即可收集细胞悬液。于倒置相差显微镜下观察复苏培养的C3H10T1/2细胞,待其生长铺满至约培养瓶底面积的70%时,加入适量已成功收集的腺病毒液,48h后利用荧光显微镜和流式细胞术分别观察腺病毒转染后的细胞生长变化及转染效率。结果：1、AdEasyGFP、AdEasyWnt3a、AdEasyBMP9在HEK293细胞中反复扩增后,细胞形态发生明显改变,即收集到了能够高度表达GFP、Wnt3a、BMP9蛋白的腺病毒液。2、镜下观察经BMP9、Wnt3a及二者联合转染C3H10T1/2细胞1周后,可见BMP9组、Wnt3a联合BMP9组细胞呈现纤维样生长... 

【文章来源】：重庆医科大学重庆市

【文章页数】：52 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

流式细施术检浏转染效率

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本文编号：3527806