SUMO特异性蛋白酶3通过调控巨噬细胞极化促进磷酸钙诱导的小鼠腹主动脉瘤形成

发布时间：2021-12-12 11:08

　　目的:探讨SUMO特异性蛋白酶3（SENP3）调控巨噬细胞极化在磷酸钙诱导的小鼠腹主动脉瘤（AAA）形成中的作用。方法:（1）分离C57BL/6背景的Senp3^flox/flox（野生型,WT）小鼠和Senp3^flox/flox;Lyz2-Cre（SENP3单核细胞特异性敲除,即条件性敲除,c KO）小鼠骨髓来源的单核细胞（BMDMs）,分别诱导其M1/M2型分化,采用RT-q PCR、Western blot和细胞免疫荧光比较SENP3表达以及M1/M2型巨噬细胞分布差异。（2）8～12周龄雄性WT小鼠和c KO小鼠用改良型磷酸钙诱导14 d构建小鼠AAA模型,比较两组小鼠的成瘤率和生存率;RT-q PCR和Western blot检测SENP3、白细胞介素1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子α（TNFα）、IL-6及基质金属蛋白酶9（MMP-9）在两组小鼠AAA组织中的表达差异;二氢乙啶染色检测组织中活性氧簇（ROS）生成差异。（3）为探讨其中机制,通过Western blot和免疫共沉淀验证SENP3与丝裂原活化蛋白激酶激酶7（MKK7）的... 

【文章来源】：中国病理生理杂志. 2020,36(05)北大核心CSCD

【文章页数】：10 页

【部分图文】：

巨噬细胞M1极化和M1/M2转化过程中SENP3表达上调

RT-qPCR和Western blot检测结果显示，cKO小鼠BMDMs中，SENP3表达显著降低（P<0.01），见图3A。cKO雄鼠和同窝出生的WT雄鼠AAA造模结果显示，cKO小鼠腹主动脉成瘤较小或无法形成AAA，见图3B，相应地，cKO组AAA造模小鼠生存率显著高于WT组（P<0.05），见图3C。改良磷酸钙法诱导的AAA中cKO小鼠AAA发生率显著低于WT组（P<0.05），见图3D;WT小鼠中，磷酸钙诱导的AAA主动脉瘤体外部直径和动脉重/总体重比值均高于cKO组（P<0.05），见图3E、F。HE染色可见正常动脉具备清晰、完整的弹力板层将内、中、外膜分开，动脉无异常扩张，内皮细胞和平滑肌细胞排列整齐；而造模后，WT组发生AAA的动脉扩张和增厚程度比cKO组严重，见图3G。此外，VVG染色可见cKO组仅有少量或无内弹性膜崩解及弹性纤维断裂（黑色着色为弹性纤维），而WT组的弹性纤维断裂更为严重，纤维断裂等级数据的差异有统计学显著性（P<0.05），见图3G、H。4 SENP3敲除抑制AAA的炎症和氧化应激

哺乳动物体内目前共发现有7种SENPs，其中SENP3对氧化应激最为敏感[16-17]，主要介导底物蛋白的去除SUMO2/3修饰（de-SUMO2/3修饰），在肿瘤增殖、转移和炎症细胞的激活中发挥重要作用。同时，在免疫应答条件下巨噬细胞极化成M1型，线粒体中大量生成ROS，在氧化应激环境下分泌释放大量的炎症因子，放大炎症损伤[5]。本研究表明SENP3在巨噬细胞M1/M2极化时存在表达差异，并且敲除SENP3能改变M1/M2巨噬细胞的诱导分布，这提示SENP3也参与调控巨噬细胞M1和M2表型转换。人类外周血单核细胞衍生的巨噬细胞蛋白质组学和转录组学分析显示，AAA与非AAA外周动脉疾病的患者之间，巨噬细胞的蛋白和基因表达谱存在显著差异，其中差异表达的基因和蛋白质富集在与AAA相关的ECM重塑和炎症等方面，表明单核-巨噬细胞谱系在AAA的ECM重塑或炎症过程具有重要作用[18]。在体外，cKO小鼠的M0受刺激后发生M1极化的比例降低，而在磷酸钙诱导的腹主动脉瘤小鼠模型中，SENP3敲除能够有效降低AAA的氧化应激损伤、炎症反应和ECM重塑，从而导致AAA发病减少和小鼠存活率的升高。以上结果表明，SENP3介导的巨噬细胞M1极化可促进AAA发生和进展。2 SENP3促进巨噬细胞炎症反应并调控ECM的机制

【参考文献】：
期刊论文
[1]法舒地尔调控巨噬细胞极化改善糖尿病小鼠心肌纤维化[J]. 谢发江,蒋松辰,高尚远,李燕,冉茂霞,李家富,冯健.  中国病理生理杂志. 2019(05)
[2]应用光学相干断层扫描成像技术分析比较急慢性中心性浆液性脉络膜视网膜病变的变化[J]. 许发宝,周立军,巩亚军,赖坤贝,黄创新,李龙辉,吕林,金陈进.  中国病理生理杂志. 2018(06)
[3]LRRK2/NF-κB信号对BCG诱导巨噬细胞RAW264.7炎症应答的调控[J]. 王启源,徐红艳,姬文兰.  中国病理生理杂志. 2018(03)



本文编号：3536566