PRMT2对人脐静脉血管内皮细胞凋亡及机制研究

发布时间：2021-12-23 07:33

　　目的:本研究主要观察PRMT2基因对人脐静脉血管内皮细胞（HUVECs）凋亡的影响,并探讨其可能机制。方法:本实验以HUVECs作为实验研究对象,分别瞬时转染PRMT2高表达及低表达质粒。通过荧光倒置显微镜观察转染后细胞内GFP绿色荧光蛋白表达情况,运用PCR,Western blot技术检测PRMT2在细胞中的表达情况。MTT法观察PRMT2对HUVECs和细胞活力的影响。细胞划痕实验观察PRMT2对HUVECs迁移率的影响。Western blot分别检测PRMT2对HUVECs凋亡相关蛋白Bcl2、Bax、caspase-3的表达情况。结果:1)PRMT2高表达质粒瞬时转染HUVECs成功后细胞内PRMT2-mi RNA及PRMT2蛋白表达水平明显增高,PRMT2低表达质粒瞬时转染HUVECs成功后细胞内PRMT2-mi RNA及PRMT2蛋白表达水平明显降低。2)PRMT2高表达明显抑制HUVECs的细胞活力和迁移,同时上调凋亡相关蛋白Bax、caspase-3表达水平,下调Bcl-2表达水平。3)PRMT2低表达明显增加HUVECs的细胞活力,并且明显促进HUVECs的迁移,... 

【文章来源】：南华大学湖南省

【文章页数】：49 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

荧光倒置显微镜观察HUVECs内GFP绿色荧光蛋白转染情况

图 4.2 A1:PCR 检测 HUVECs 内 PRMT2-miRNA 表达情况；B1:为 A1 的统计A2:Western Blot 检测 HUVECs 内 PRMT2 蛋白表达情况；B2:为 A2 的统计注：*P<0.05；与 CON 组相比4.1.2 PRMT 低表达抑制 PRMT2-miRNA，PRMT2 蛋白的表达采用 Lipofectamine2000 将 LacZ-miRNA 空载质粒（NC），pcDNA6.2-GW/EmGFP-PRMT2-miRNA1 低表达质粒（PRMT2-miRNA1）pcDNA6.2-GW/EmGFP-PRMT2-miRNA2 低表达质粒（PRMT2-miRNA2）HUVECs 内，培养 24h 后在荧光倒置显微镜下观察细胞荧光强度，荧光4.3），除空白对照（CON）组外，其它各组均可见绿色荧光蛋白（GFP）染 HUVECs 成功。为检测目的基因表达情况，采用 PCR 和 Western blot 分PRMT2 的表达。PCR 结果显示，PRMT2-miRNA1 和 PRMT2-miRNA2 组NC 组相比，PRMT2-miRNA 的表达水平在 HUVECs 细胞中显著下调，差

培养 24h 后在荧光倒置显微镜下观察细胞荧光强度，荧光结果显示（图4.3），除空白对照（CON）组外，其它各组均可见绿色荧光蛋白（GFP），说明质粒转染 HUVECs 成功。为检测目的基因表达情况，采用 PCR 和 Western blot 分别检测细胞内PRMT2 的表达。PCR 结果显示，PRMT2-miRNA1 和 PRMT2-miRNA2 组与 CON 组，NC 组相比，PRMT2-miRNA 的表达水平在 HUVECs 细胞中显著下调

【参考文献】：
期刊论文
[1]线粒体膜通透性变化与细胞凋亡的关系[J]. 丛义梅,李鑫,贾红玲,关伟军,马月辉.  中国畜牧兽医. 2008(10)

博士论文
[1]E.tenella宿主细胞钙稳态在线粒体凋亡途径中的作用与机理[D]. 崔小珍.山西农业大学 2016
[2]溴氰菊酯神经细胞凋亡信号转导机制的研究[D]. 陈丹.华中科技大学 2006
[3]半边莲生物碱和山梗菜碱对人血管内皮细胞保护作用的机制研究[D]. 范秀珍.山东大学 2005



本文编号：3548069