重组人脑利钠肽与呋塞米序贯治疗对射血分数降低的心衰大鼠利尿效果的影响及其机制

发布时间：2022-08-13 12:50

　　目的:通过测定射血分数降低的心力衰竭（heart failure with reduced ejection fraction,HFREF）大鼠肾脏水通道蛋白2（aquaporin-2,AQP2）表达及尿AQP2浓度,探讨重组人脑利钠肽（Recombinant human brain natriuretic peptide,rhBNP）与呋塞米序贯治疗应用于射血分数降低心衰大鼠,观察对利尿效果的影响以及形成机制,并为临床何时应用rhBNP改善射血分数降低心衰液体潴留及利尿剂抵抗效果最佳提供理论依据。方法:采取结扎雄性Wistar大鼠左前降支,建成急性心肌梗死后CHF模型。手术4周后,存活大鼠接受动物超声检测,左室射血分数（Ejection Fraction,EF）<55%,提示动物模型建立成功。建模成功的大鼠随机分为模型组,2周rhBNP+2周呋塞米组,2周呋塞米+2周rhBNP组,rhBNP+呋塞米组,另设假手术组。干预4周采集血、尿标本,记录24h出入量（干预2周、4周）。检测血浆血管紧张素II（Angiotensin II,AngII）、醛固酮（Aldosterone,AL... 

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【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
第1章 前言
第2章 材料与方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 主要实验仪器
        2.1.2 试剂
    2.2 主要溶液及配置
        2.2.1 冻干重组人脑利钠肽（rhBNP）配置成浓度为10ug/ml的溶液
        2.2.2 Western Blot溶液配制
    2.3 药物
    2.4 实验方法
        2.4.1 实验动物及分组
        2.4.2 模型制备
        2.4.3 给药剂量、途径及时间
    2.5 超声心动图检测
    2.6 标本的收集与预处理
    2.7 HE染色
    2.8 免疫组化染色
        2.8.1 取材
        2.8.2 脱水、透明、浸蜡
        2.8.3 包埋
        2.8.4 切片
        2.8.5 烤片
        2.8.6 免疫组化染色
    2.9 ELISA方法
    2.10 Western Blot测定肾脏髓质AQP2 蛋白表达
        2.10.1 蛋白抽提
        2.10.2 BCA法蛋白定量
        2.10.3 制备上样蛋白
        2.10.4Western Blot实验
    2.11 Real-Time PCR测定肾脏髓质AQP2mRNA表达
        2.11.1 引物的合成
        2.11.2 提取样本总RNA
        2.11.3 电泳
        2.11.4 反转录
        2.11.5 RT-PCR
    2.12 统计学处理
第3章 结果
    3.1 手术及干预期间大鼠的存活状况
    3.2 大鼠血浆AngII、ALD、AVP浓度
    3.3 大鼠血浆NT-proBNP浓度
    3.4 大鼠尿液AQP2 排泄率(即AQP2 浓度/肌酐)
    3.5 大鼠24 小时出入量差值
    3.6 干预4周后大鼠超声结果
    3.7 干预4 周后大鼠肾脏AQP2 蛋白表达
    3.8 干预4 周后大鼠肾脏AQP2 mRNA表达
    3.9 干预4 周后心衰大鼠肾内髓质AQP2的MOD值
    3.10 大鼠肾脏HE染色结果的分析
第4章 附图
第5章 附表
第6章 讨论
结论
参考文献
致谢
附录
作者简介



本文编号：3677065