5-氨基酮戊酸与柠檬酸亚铁钠诱导自噬的心肌保护作用及其机制的研究

发布时间：2022-10-29 10:52

　　目的:本实验的目的是以小鼠心肌细胞为研究对象,研究ALA/SFC是否可以通过HO-1诱导自噬以保护心肌细胞免受缺氧引起的细胞凋亡,并对其可能的机制和信号通路进行探索。方法:分别使用ALA/SFC预处理小鼠心房心肌细胞HL-1细胞,使其暴露于缺氧状态,通过CCK-8检测细胞存活率、TUNEL染色检测细胞凋亡情况、MDC染色检测细胞自噬情况、及细胞活性氧（ROS）、蛋白质印迹分析、细胞免疫荧光染色、siRNA敲降相应基因等实验步骤,对小鼠心肌细胞活性、氧化应激水平、凋亡情况、HO-1、Nrf-2和MAPKs表达水平及自噬水平进行评估,探讨ALA/SFC在缺氧引起小鼠心肌细胞系（HL-1细胞）损伤中的作用机制。结果:ALA/SFC预处理可显着减轻缺氧诱导的心肌细胞凋亡,活性氧产生和线粒体损伤,同时增加细胞活力和自噬水平。ALA/SFC的HO-1表达与Nrf-2的上调和核转位有关,而Nrf-2 siRNA大幅度降低了 HO-1的表达。ERK1/2,p38和SAPK/JNK途径被ALA/SFC激活,它们的特异性抑制剂明显降低了ALA/SFC介导的HO-1上调。Nrf-2或HO-1沉默,和自噬抑制... 

【文章页数】：47 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１：?ＡＬＡ／ＳＦＣ对缺氧诱导的心肌细胞凋亡的保护作用

图２：?ＡＬＡ／ＳＦＣ能改善缺氧诱导的氧化应激以及ＡＬＡ／ＳＦＣ诱导ＨＬ－１细胞自噬及Ｈ０－１表达

图３：?ＡＬＡ／ＳＦＣ增强了?Ｎｒｆ－２的核转运，Ｎｒｆ－２通过激活ＨＬ－ｌ细胞中依赖于Ｎｒｆ－２的ＭＡＰＫｓ??信号通路调节ＨＯ－１的表达？?（Ａ）?ＡＬＡ?（ｌＯＯＯｕＭ）和ＳＦＣ?（５００?ＵＭ）处理６?ｈ后ＨＬ－?

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3697552