NOX/ROS在5-HT介导大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖中的作用

发布时间：2022-11-05 01:57

　　目的研究5-羟色胺（5-HT）介导的肺动脉平滑肌细胞增殖是否与细胞内活性氧（reactive oxygen species, ROS）升高有关,并明确NADPH氧化酶（NADPH oxidase, NOX）在ROS产生及可能由此导致的肺动脉平滑肌细胞增殖中的作用。方法组织块法建立人肺动脉平滑肌细胞（pulmonary artery smooth muscle cells, PASMCs）细胞系。分别设置正常对照组,不加任何药物; 5-HT组,给予5-HT（1μmol/L）刺激细胞;各干预组分别给予ROS清除剂Tempol（100μmol/L）、NOX抑制剂DPI（20μmol/L）、ERK抑制剂PD98059（30μmol/L）预处理,再加入5-HT刺激不同时间。处理完成后测定各组NOX活性,采用DCF-DA荧光探针检测细胞内ROS的生成,3H-TdR掺入法检测PASMCs的增殖,免疫印迹杂交法检测ERK1/2磷酸化水平。结果研究发现5-HT刺激可明显增强NOX活性（P＜0.05）,引起ROS的增加（P＜0.05）,DNA合成增加（P＜0.05）,ERK1/2磷酸化水平增加（P＜0.0... 

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 主要试剂与仪器
    1.2 PASMC的培养及分组
    1.3 [3H]胸苷掺入测定
    1.4 NOX活性测定
    1.5 细胞内ROS含量检测
    1.6 磷酸化ERK1/2的测定
    1.7 统计
2 结果
    2.1 3H-TdR掺入量法检测结果
    2.2 NOX活性测定结果
    2.3 细胞内ROS水平检测结果
    2.4 磷酸化ERK1/2水平测定结果
3 讨论



本文编号：3701705