SRF在低氧诱导大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖中的作用

发布时间：2023-03-11 07:04

　　目的:探讨SRF在低氧诱导大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖中的作用方法:1.大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)的原代培养:采用酶消化法从健康SD大鼠体内分离出PASMCs进行体外培养,采用免疫细胞化学鉴定PASMCs,取3-4代细胞用于后续的实验。2.低氧对细胞增殖的影响:设置常氧对照组(21%),以及低氧组,低氧组通过低氧培养箱设置四个不同氧浓度,分别为10%,5%,2%,1%,培养大鼠PASMCs。设定24h、48h和72h不同时间段。描绘各组细胞生长曲线,并用MTT法来观察细胞生长情况,检测其细胞增殖活性。3.低氧条件下SRF对细胞增殖的影响:设计出针对大鼠SRF基因的si RNA序列,实验分成四组,分别为常氧组、常氧干预组、低氧组及低氧干预组。常氧培养条件为:21%O2、74%N2和5%CO2,低氧组培养条件为:1%02、94%N2、5%CO2。干预组采用的是设计SRF干扰序列即si RNA,将SRF si RNA转染至干预组PASMCs中,分别设定24h、48h和72h三个不同的时间点。采用免疫细胞化学染色法,观察SRF在PASMCs中表达情况。并采用real-time PCR和W...

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【学位级别】：硕士

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英文摘要
1.前言
2.材料与方法
3.实验结果
4.讨论
5.结论
参考文献
附录
致谢
综述
    参考文献



本文编号：3759422