微小RNA-142-3p靶向Rictor诱导动脉粥样硬化相关的内皮细胞凋亡

发布时间：2023-03-31 07:45

　　目的:探讨微小RNA-142-3p(miR-142-3p)对动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)进程中人主动脉内皮细胞(human aortic endothelial cells,HAECs)凋亡的影响及作用机制。方法:HAECs经氧化型低密度脂蛋白(oxi?dized low-density lipoprotein,ox-LDL)作用后,采用RT-qPCR检测miR-142-3p的表达水平。Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术(flow cytometry,FCM)和caspase-3活性检测试剂盒检测细胞凋亡。使用Target Scan等生物信息学软件预测miR-142-3p的潜在靶基因,双萤光素酶报告基因实验验证miR-142-3p与Rictor mRNA 3′-UTR直接靶向结合。结果:在ox-LDL诱导HAECs凋亡过程中miR-142-3p表达显著上调(P<0.05,P<0.01)。过表达miR-142-3p促进HAECs凋亡,相反,抑制miR-142-3p的表达水平可以部分程度缓解ox-LDL介导的内皮细胞(endothelia...

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【文章目录】：
材料和方法
    1 材料
    2 方法
        2.1 细胞培养
        2.2 细胞表型鉴定
        2.3 细胞转染和细胞处理
        2.4 caspase-3活性检测和流式细胞术检测细胞凋亡
        2.5 CCK-8实验测定细胞活力
        2.6 RT-q PCR检测mi RNA的水平
        2.7 Western blot检测蛋白水平
        2.8 RT-q PCR检测m RNA的表达
        2.9 双萤光素酶报告基因实验
    3 统计学处理
结果
    1血管内皮细胞鉴定
    2 mi R-142-3p在HAECs凋亡过程中表达上调
    3 Rictor是mi R-142-3p在HAECs中的靶基因之一
    4 下调mi R-142-3p抑制HAECs的凋亡
    5 mi R-142-3p通过靶向Rictor调节HAECs凋亡
    6 Akt/e NOS信号通路参与了mi R-142-3p对HAECs凋亡的调控
讨论



本文编号：3775446