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FN1基因转录本在小鼠心脏发育过程中的表达

发布时间:2023-05-19 01:56
  目的:纤维连接蛋白基因(fibronectin1, FN1)作为细胞外基质(extracellular matrix, ECM)的重要成份,是心脏正常组织结构的基本组成部分。通过实验观察FN1在小鼠心脏发育中的转录本表达特征,探讨FN1与心脏发育的关系。 方法:C57小鼠以1:1雌雄同窝饲养,以观察到阴道栓的最早时间计为胚龄0d,以观察到乳鼠出生的最早时间计为生后Od。解剖获取胎龄E11.5,12.5,13.5,14.5,15.5,16.5,17.5,18.5,19.5d胎鼠和生后Pld仔鼠心脏,每时间点4只,提取其RNA,通过建立逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR),获得相应的cDNA。根据Fnl基因转录本的结构差异(EIIIB, EIIIA和ⅡCS),设计3对引物,通过特异性聚合酶链式反应(PCR)方法及琼脂糖凝胶电泳分析鉴定FN1转录本在胚胎鼠心脏中的动态表达情况。利用同样方法鉴定Fnl在成年小鼠(3月龄)心脏中的转录本。实验过程中对动物的处理均符合动物伦理学标准。 结果:Fn分子是一个二聚体糖蛋白,其单体亚单位由Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型三种类型的结构域重复不同次数和一个Ⅲ型结构域连接片段I...

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    二、研究材料和方法
结果
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